РАКЕТОЙ «ОНИКС» (»ЯХОНТ»). НОВОСТИ THE MISSILE COMPLEX WITH ANTI-SHIP MISSILE «ONYX» (»YAKHONT»). NEWS 19.03.2015 МНОГОЦЕЛЕВОЙ ИСТРЕБИТЕЛЬ СУ-30СМ В Федеральной службе по военно-техническому сотрудничеству (ФСВТС) «Известиям» заявили, что Россия переговоров о закупке данной ракеты в настоящее время не ведет. В Минобороны России пояснили, что любое оружие, производимое на территории РФ на экспорт отличается несколько «загрубленными» характеристиками по сравнению с изделиями, поступающими на вооружение российской армии. Ракета BrahMos создана на основе экспортной российской ракеты «Яхонт», разработки 80-х годов. На базе концепции BrahMos в России был разработан универсальный противокорабельный ракетный комплекс среднего радиуса действия «Оникс».  — В 2014 году завершены опытно-конструкторские работы и заводские испытания «Оникса» в интересах Вооруженных сил Российской Федерации, – пояснили в Минобороны. – Полученные характеристики превзошли ТТХ ракеты BrahMos. До 2016 года [российские] ракеты будут проходить государственные испытания. По их результатам будет принято решение о принятии нового комплекса на вооружение. По информации представителей военного ведомства, «Ониксы» уже серийно поставляются ВМФ для госиспытаний. Известия.ru ПРОТИВОКОРАБЕЛЬНАЯ РАКЕТА «БРАМОС» Изготовление будет вестись на основании совместного Решения №235/1/1/8565 от 6 ноября 2014г. и техническим заданием «Доработка УВПУ 3С-14-22350 для комплексов 3К-14, 9К, 3М55, 3К-22 применительно к заказу 11442М». http://bmpd.livejournal.com УНИВЕРСАЛЬНЫЕ ВЕРТИКАЛЬНЫЕ ПУСКОВЫЕ УСТАНОВКИ ЗС-14 ДЛЯ МОДЕРНИЗАЦИИ КРЕЙСЕРА «АДМИРАЛ НАХИМОВ»  ТАСС КРЫЛАТАЯ РАКЕТА УПАЛА НА ДОМ В АРХАНГЕЛЬСКОЙ ОБЛАСТИ СМИ ОПУБЛИКОВАЛИ ФОТО ПАДЕНИЯ РАКЕТЫ ПОД СЕВЕРОДВИНСКОМ СТОРОЖЕВОЙ КОРАБЛЬ (ФРЕГАТ) ТИПА «АДМИРАЛ ГОРШКОВ» ПРОЕКТА 22350 Кроме того, «был реализован переход на новую элементную базу, осуществлена замена ряда конструкционных материалов, в связи с доработками повторена значительная часть стендовых испытаний приборов и агрегатов», добавил он. РИА Новости 22.10.2016 РИА Новости УНИВЕРСАЛЬНАЯ РАКЕТНАЯ СИСТЕМА «КАЛИБР» (CLUB) «В летопись нашего ВМФ вписано боевое применение подводной лодкой ракетного комплекса «Калибр» по объектам запрещенной в Российской Федерации террористической группировки «Исламское государство» в ходе операции российских Вооруженных Сил в Сирии», – напомнил он. В конце 2015 года подлодка Черноморского флота «Ростов- на-Дону», находясь в Средиземном море, впервые в истории подводного флота России нанесла удар крылатыми ракетами «Калибр» по объектам террористической группировки «Исламское государство» (запрещена в РФ) в Сирии. Ракетные комплексы «Калибр» и «Оникс» установлены на многоцелевой атомной подлодке четвертого поколения проекта 885 «Ясень». Головной корабль этой серии – «Северодвинск» – в 2016 году завершил опытную эксплуатацию, длившуюся несколько лет, и был принят в боевой состав ВМФ РФ. ТАСС УНИВЕРСАЛЬНАЯ РАКЕТНАЯ СИСТЕМА «КАЛИБР» (CLUB) В «Приложении №1 к договору» между «НПО машиностроения» и «Северной верфью» указано, что проверка комплекса «Оникс» на этапе швартовных испытаний продлится до 15 августа. На ходовые испытания корвета с проверкой противокорабельного комплекса отведен период с 16 августа по 30 сентября. Наконец, госиспытания и приемка заказчиком должны пройти в октябре. Ракеты «Оникс» на «Гремящем» размещаются в установках вертикального пуска 3С14. Они универсальны и позволяют из тех же ячеек применять ракеты «Калибр» (3К14). При этом неизвестно, планируется ли испытать пуск «Калибров» с «Гремящего» до сдачи корабля заказчику. В пресс-службе Северной верфи не ответили на этот вопрос, сославшись на то, что он находится в компетенции ВМФ. flotprom.ru КОРВЕТ ТИПА «ГРЕМЯЩИЙ» ПРОЕКТА 20385 На Международном военно-техническом форуме Армия-2017 на открытой площадке у павильона Корпорация «Тактическое ракетное вооружение» (КТРВ) ВПК «НПО Машиностроения» представила противокорабельная крылатая ракета «Яхонт», в отечественном ВМФ данная ракета имеет обозначение «Оникс». ПРОТИВОКОРАБЕЛЬНАЯ КРЫЛАТАЯ РАКЕТА «ЯХОНТ» НА АРМИЯ-2017 ЕДИНЫЙ ДЕНЬ ПРИЕМКИ ВОЕННОЙ ПРОДУКЦИИ 18.10.2019 БЕРЕГОВОЙ ПРОТИВОКОРАБЕЛЬНЫЙ РАКЕТНЫЙ КОМПЛЕКС «БАСТИОН» СТОРОЖЕВОЙ КОРАБЛЬ (ФРЕГАТ) ТИПА «АДМИРАЛ ГОРШКОВ» ПРОЕКТА 22350 На Международном Военно-морском салоне МВМС-2021 в Санкт-Петербурге АО «Концерн «Гранит-Электрон» на общей экспозиции Корпорации «Тактическое ракетное вооружение» представило модернизированную моноимпульсную головку самонаведения (ГСН) сверхзвуковой крылатой ракеты «Яхонт», обеспечивающую поиск и обнаружение морских и наземных целей в условиях радиоэлектронного противодействия, селекцию ложных целей, выбор цели по заданным критериям, захват и сопровождение выбранной цели, выработку координат цели и выдачу их в систему автопилотирования ракеты. ХАРАКТЕРИСТИКИ ГСН «ЯХОНТ» ВТС «Бастион», 11.07.2021 ГОЛОВКУ САМОНАВЕДЕНИЯ РАКЕТЫ «ЯХОНТ» ПОКАЗАЛИ НА МВМС-2021 И РАССКАЗАЛИ О ПЕРСПЕКТИВАХ МОДЕРНИЗАЦИИ БАСУ КРЫЛАТЫХ РАКЕТ РАКЕТНЫЙ КОМПЛЕКС С ПРОТИВОКОРАБЕЛЬНОЙ РАКЕТОЙ «ОНИКС» (»ЯХОНТ»). НОВОСТИ 2011-2014 |
03.2015
Договор о проведении работ «НПО машиностроения» и «Северная верфь» подпишут до 4 июля.
Третий дивизионный комплект изготовлен и транспортируется к месту базирования. Также уже сданы 38 ракет «Оникс», 17 единиц изготовлены и транспортируются получателям.
03.2021
В 2020 году фрегат «Адмирал Флота Советского Союза Горшков» провел комплекс испытаний современного гиперзвукового оружия морского базирования в Белом море, он выполнил три испытательных пуска гиперзвуковой крылатой ракеты «Циркон», напоминает ВТС «Бастион».
Этот комплекс позволяет проверять совместную работу алгоритмов, программного обеспечения и изготовленной аппаратуры в безэховой камере, создавая реальную фоно-целевую обстановку.
Битва противокорабельных ракет. «Гарпун» vs «Оникс»
Современный флот – это уже давно не просто корабли для уничтожения других кораблей.
Задачи у различных военных судов могут быть самыми разными, хоть сейчас большинство морских адмиралов и склоняется к универсальности.
Меж тем, какие бы функции не возлагались на моряков, главной их задачей остается отправить на дно противника, а уж потом, кто во что горазд, — высаживать десант, запускать ракеты класса «корабль-поверхность» и т.д.
Если вы посмотрите на любой американский боевой корабль, от ракетного крейсера типа «Тикондерог» до самого современного эсминца типа «Арли Бёрк», то вы обнаружите у них на вооружении противокорабельные крылатые ракеты RGM-84 «Гарпун».
Возьмите хоть самые древние подводные лодки проекта «Лос-Анджелес» или последние субмарины проекта «Вирджиния», вы в чреве каждой найдете UGM-84 «Гарпун».
И даже самолеты, что взлетая с авианосцев, будут нести противокорабельное вооружение, под фюзеляжем у них все равно будут болтаться крылатые ракеты AGM-84 «Гарпун».
Ту же противокорабельную ракету вы обнаружите на военных судах Германии, Дании, Турции, Японии и многих других.
Некоторые из этих стран стараются ставить на новые корабли уже ракеты собственной разработки, если таковые имеются.
Да и сами американцы уже пытаются разработать что-то новенькое, но пока как-то вяло. Правда, если это у них получится, то сыграет большая проблема большого флота — его очень дорого перевооружить, а ждать, когда корабли с новым вооружением заменят старые… на это уйдет минимум лет тридцать.
Поэтому если говорить о противокорабельном вооружении Флота США, нужно говорить о крылатых ракетах «Гарпун».
«Гарпун» для мертвых кораблей
Эта крылатая ракета производится с 1975 года, а начало разработки – 1968 год.
Вы спросите, где 2016 годы и где 1968?
Да, далеко.
Но такова особенность военно-промышленного комплекса США. Конструкторы оружия предпочитают придумать что-то удачное, а затем бесконечное количество времени заниматься его модернизацией и производить, желательно, партиями побольше. Вкладываться в разработку они решают только в крайнем случае.
Соответственно и тактико-технические характеристики «Гарпунов» оставляют желать лучшего.
• Осколочно-фугасная боевая часть весом всего в 225 кг.
• Максимальная скорость — 850 км/ч (0,8 Маха).
С корабля ракету запускает твердотопливный стартовый ускоритель, а затем разгоняет маршевый двигатель. Сначала ракета идет заданным курсом на высоте от 15 до 900 метров, а затем включает радиолокационную головку самонаведения и ищет цели в секторе 45 градусов впереди себя. Радиус поиска цели максимум 40 км для цели типа эсминец, для катера — 18 км.
Как только ракета обнаружила цель, она атакует: либо стелясь над водой на высоте 2-4 метров, либо поднимаясь на высоту 1800 метров и пикируя оттуда.
Вот и вся нехитрая тактика.
Как вы видите, упор сделан на низкую высоту полета.
Способна ли такая ракета долететь до современной цели, имеющей на борту эффективные средства ПВО?
Маловероятно. Если только это будет уже мертвый корабль.
«Оникс»
Эта противокорабельная ракета разработана в конце 70-х годов и изначально была призвана стать аналогом «Гарпуна» по массовости и универсальности. Поэтому мы взяли для сравнения ее, а не те же более современные «Калибры».
И «Оникс» сразу побеждает «Гарпун» по дальности стрельбы – 300 км. Янки не успеют подойти на дальность стрельбы, а к ним уже будут подлетать наши ракеты.
Второе преимущество – это скорость в 2 Маха, что делает нашу ракету ну очень быстрой. Среагировать на приближение такой оперенной смерти будет гораздо сложнее.
Третья сильная сторона «Оникса» – максимальный потолок на маршевом участке пути – 14 км (и скорость на высоте в 2,6 Маха). Далеко не каждый ЗРК сможет перехватить ее на такой высоте.
А когда на последнем участке пути длиною в 40 км «Оникс» опустится до высоты в 15 метров над водой, то, чтобы не быть сбитым, он еще и начнет маневрировать.
При этом ракету можно использовать с различными траекториями полета, комбинируя высокую и низкую.
И в ракетах, в отличие от самолета, русские любят применять технологии «Стелс» (Stealth).
Можно ли сбить такую ракету?
Можно.
Однако для этого придется постараться, а если хотя бы одна из десятка запущенных пройдет хваленую американскую систему «Иджис», то боевой части в 300 кг хватит, чтобы нанести серьезные повреждения даже самому большому кораблю.
Как считали сами американцы, два попадания их «Гарпуна» в цель способны потопить целый эсминец, а для крейсера хватит четырех. Думаю, с более мощным «Ониксом» соотношения как минимум не больше.
Разница лишь в том, что «Гарпун» может топить разве что наши баржи. А вот у «Оникса» есть все шансы прорваться через американскую систему ПВО. Однако об этом мы поговорим в следующей статье.
Российская академия ракетных и артиллерийских наук — : От «Сопки» до «Бастиона»
Береговой ракетный комплекс (БРК) «Бал-Э»
Боевое применение российских береговых ПКР
Первые в мире противокорабельные ракеты (ПКР) наземного базирования были созданы в СССР.
Сначала их, как и все ПКР, называли самолетами-снарядами. Термин «крылатая ракета» был введен приказом Министерства обороны СССР от 30 октября 1959 года.
В начале 50-х годов XX века был создан противокорабельный самолет-снаряд «Комета», затем на его базе комплексы «Стрела» – корабельный (КСС) и береговой подземный. На их основе началось проектирование мобильного берегового комплекса «Сопка». Ракеты С-2 (4К-87) комплексов «Стрела» и «Сопка» были практически одинаковыми, поэтому в 60-х годах комплекс «Стрела» часто именовали стационарным комплексом «Сопка».
«Сопка»
Мобильный береговой комплекс оснащался самолетами-снарядами С-2 (4К-87). Целеуказание – внешнее, с береговой батареи, станция С-1М. Система управления (СУ) – инерциальная (ИНС). Головка самонаведения (ГСН) – полуактивная. Боевая часть (БЧ) – фугасная, вес взрывчатого вещества – 860 килограммов. Пусковая установка (ПУ) – подвижная, Б-163. Минимальная дальность – 15 километров, максимальная – 95.
Маршевая скорость – 300 километров в час. Скорость передвижения ПУ – 35 километров в час. Готовность к пуску – 30 минут. Система управления оружием (СУО) включала (данные по береговому стационарному ракетному комплексу «Утес») РЛС обнаружения «Мыс» с дальностью действия 185 километров, центральный пост, совмещенный с РЛС наведения С-1М и РЛС слежения «Бурун».
Начало проектирования – 1 декабря 1955 года. Первый пуск – 27 ноября 1957-го. Принят на вооружение 19 декабря 1958 года.
Боевая служба – 1962–1971 годы. При 211 пусках обеспечено 107 попаданий (СФ – 44/16, ЧФ – 93/39, БФ – 34/23, ТОФ – 40/29).
Любопытно, что у камчатской «Сопки» 21-го отдельного берегового ракетного полка (обрп) ТОФа был шанс стать противолодочным оружием. Осенью 1959 года американская ДЭПЛ «Танни» типа «Балао», вооруженная двумя крылатыми ракетами «Регулус-1», патрулировала у берегов полуострова. Янки бахвалились, что для пуска своих ракет им требовалось десять минут пребывания в надводном положении.
Фактически это время достигало 30 минут. Так что наш комплекс имел все шансы поразить американскую ДЭПЛ. Однако сразу после первого пуска «Сопки» американцы быстро отошли от берега за стокилометровый рубеж.
В 1968 году расчеты комплексов «Сопка» с Балтийского и Черноморского флотов были отправлены в Египет. Там же 9 октября 1973-го состоялось первое боевое применение. По четырем израильским катерам, приблизившимся к порту Александрия, было выпущено пять ракет С-2. По египетским данным, один катер потоплен, другой получил повреждения. Израиль объявил, что все ракеты прошли мимо.
«Редут»
Береговой ракетный комплекс (БРК) оснащался ракетами П-35Б и 3М44 «Прогресс». Целеуказание – внешнее по радиотехнической станции наблюдения (РTСН). Схема наведения: набор высоты – по ИНС, обнаружение целей – по бортовой радиолокационной системе (БРЛС), передача радиолокационного изображения (РЛИ) оператору РТСН, после выбора оператора цели – по ГСН.
СУ – ИНС+БРЛС. ГСН – радиолокационная (РЛ ГСН). БЧ – кумулятивно-фугасная или специальная (20 кТ), вес первой – 460 килограммов. ПУ – подвижная, СПУ-35 (СПУ-35Б), шасси – ЗиЛ-135К/БАЗ-135МБ. Максимальная дальность – 300 километров. Рабочая дальность стрельбы зависела от выбранного режима высоты полета: 55 километров при высоте 400 метров (режим В1), 200 – при высоте 4000 метров (В2), 300 – при высоте 7000 метров (В3). Дальность в режиме разведки – 450 километров. Маршевая скорость – 500 километров в час. Скорость передвижения ПУ – 40 километров в час (по шоссе), максимальная – 65. Запас хода – 500 километров. Время перехода из походного в боевое положение – 1,5 часа. Пуск ракеты производился под углом 20 градусов. СУО – «Скала» (4Р43).
Начало проектирования – 16 августа 1960 года, ракеты «Прогресс» – 1974-й. Начало государственных испытаний – 6 ноября 1961 года. Принят на вооружение 11 августа 1966-го. Боевая служба – 1963-й – по настоящее время.
Американский линкор «Нью-Джерси» с конца 1983-го стал регулярно обстреливать территорию Ливана, где шла гражданская война.
В день он выпускал до трехсот 406-мм снарядов. Сам же линкор находился вне зоны огня полевой артиллерии. Досталось и сирийским войскам, дислоцированным в долине Бекаа. Был убит генерал. В Казачьей бухте Севастополя на сухогруз Морфлота погрузили матчасть полка «Редутов» и личный состав, собранный из ракетных частей Черноморского флота. Моряки получили приказ после прибытия в ливанский порт за три дня совершить марш в позиционный район и нанести удар по «Нью-Джерси». Однако, как полагают, из-за бдительности американской разведки приказ выполнить не удалось. Менее чем через 24 часа после выгрузки матчасти линкор полным ходом ушел на запад и впредь в Восточном Средиземноморье не объявлялся.
С 16 июля по 2 августа 1985 года 21-й обрп ТОФа находился на боевом дежурстве по пресечению нарушений государственной границы атомным крейсером «Техас» ВМС США. Оценка за несение боевого дежурства – отлично.
С 17 мая по 11 июня 1987 года полк аналогичным образом отработал по атомному крейсеру «Арканзас».
Оценка за несение боевого дежурства – отлично.
«Рубеж»
Оснащается ракетами П-15М «Термит» с новым радиовысотомером: вариант П-21 – с активной импульсной радиолокационной (АИРЛ) ГСН, вариант П-22 – с пассивной тепловой (ИК) ГСН. Целеуказание – автономное – РЛС ЦУ «Гарпун» на самоходной ПУ (СПУ), дальность обнаружения – 120 километров. ПУ – самоходная 3С-51, шасси – МАЗ-543В(543М). Средняя скорость передвижения – 50 километров в час.
Начало проектирования – 1970-й. За время испытаний в 1974–1978 годах выполнено свыше 20 пусков. Принят на вооружение 22 октября 1978-го.
Боевая служба – 1978-й – по настоящее время. Учения: 1980 год – две СПУ 1267-го отдельного берегового ракетного дивизиона (обрд) ЧФ («Братство по оружию-80», ГДР), 1981 год – 1267-й обрд («Запад-81», полигон БФ Хмелевка), 1983 год – две СПУ 1267-го обрд («Запад-83», мыс Таран, 12 км от Светлогорска, БФ), 1988 год – СПУ 1267-го обрд («Осень-88», мыс Тарханкут – мыс Егорлыцкий Кут, ЧФ), обрд СФ в 1988 году (пусков – два, попаданий – нет), 14 ноября 1989 года – обрд СФ (пусков – более одного, попаданий – более одного), 17 сентября 2011 года – учения СПУ «Рубеж» и СПУ «Редут» 520-й отдельной береговой ракетно-артиллерийской бригады (обрабр) ТОФа (Камчатка).
В 1980 году две СПУ 3С-51 из 1267-го дивизиона были отправлены из Крыма в ГДР для участия в учениях «Братство по оружию-80». Так как к этому времени на Балтике еще не было боеготовых «Рубежей», черноморцам пришлось сыграть роль балтийцев. Поэтому СПУ отвезли не прямо в ГДР, а по железной дороге до Балтийска, а оттуда на десантных кораблях проекта 775 морем в Свинемюнде.
На учениях «Запад-81» СПУ 1267-го дивизиона стреляли уже на десантном полигоне Балтийского флота Хмелевка.
В ходе учений «Запад-83», проводившихся у мыса Таран в 12 километрах от Светлогорска, приняли участие балтийские четыре СПУ «Редут» 27-го обрп БФ, а от Черноморского флота – две СПУ «Рубеж» 1267-го дивизиона. По наводке системы внешнего целеуказания МРСЦ-1 с вертолета Ка-25С были выпущены две ракеты П-35Б, а через 30 секунд – две П-21 с БРК. Результаты стрельбы признаны успешными.
В 1988 году в ходе учений «Осень-88» СПУ 1267-го дивизиона прошли маршем от места дислокации у мыса Тарханкут до мыса Егорлыцкий Кут в районе Херсона.
320-километровый марш дивизион совершил со средней скоростью 50 километров в час. Как видим, СПУ 3С-51 оправдали принятое среди специалистов прозвище комплекса – колесный ракетный катер (вся аппаратура взята с катера проекта 205У). РЛС «Гарпун» обнаружила цель на дальности 120 километров. Дивизион двумя ракетами поразил ее.
В январе 1986 года на Северном флоте был сформирован обрд с БРК «Рубеж», дислоцированный на полуострове Рыбачий в поселке Скарбеевка. Первые два пуска ракет «Термит» в 1988-м оказались неудачными, и лишь 14 ноября 1989 года был произведен нормальный пуск.
«Бастион»
Ракеты стационарного комплекса «Бастион-С» размещаются в шахтных пусковых установках (ШПУ). «Бастион-П» – подвижный. БРК оснащается ракетами «Оникс» («Яхонт», П-800, 3М-55). ПУ «Бастион-П» – самоходная, шасси – МАЗ-543 (установлены три контейнера с ракетами) и МЗКТ-7930.
5 июля 1981 года вышло постановление Совета министров СССР о начале работ над сверхзвуковой ПКР «Оникс». 10 марта 1982-го в ОКБ-52 прошла защита эскизного проекта. ПКР выполнена по нормальной аэродинамической схеме с трапециевидным складным крылом и оперением. Аэродинамика планера в сочетании с высокой тяговооруженностью обеспечивает «Ониксу» высокую маневренность (максимальный угол атаки – до 15 градусов), позволяющую ракете выполнять эффективные маневры уклонения от средств ПВО противника.
Силовая установка «Оникса» состоит из маршевого прямоточного воздушно-реактивного двигателя (ПВРД), работающего на жидком топливе (керосин Т-6), и твердотопливного ускорителя, установленного по принципу «матрешка» в камере сгорания маршевого двигателя. Несколько секунд его работы разгоняют ракету до скорости М=2. Затем стартовик выключается, его выбрасывает из маршевого двигателя набегающим потоком воздуха и «Оникс» продолжает полет на скорости М=2,5, обеспечиваемой ПВРД.
Полетное задание формируется по данным от автономного источника целеуказания. РЛС головки самонаведения может захватывать надводную цель типа «крейсер» на дальности до 75 километров.
После первоначального захвата цели ракета выключает РЛС и выполняет снижение на предельно малые высоты (порядка 5–10 метров).
В состав комплекса «Бастион-П» входят до восьми СПУ, машина боевого управления на шасси МЗКТ-65273, вертолетный комплекс целеуказания, оборудование для головного командного пункта.
Дальность ракет 3М55 «Оникс» по комбинированной траектории – 300 километров (при конечном участке до 40 километров), а по низковысотной – до 120. СУ – ИНС+радиовысотометр+РЛ ГСН. Вес БЧ – 200 килограммов.
Чтобы изыскать средства для доводки комплекса, оба варианта – подвижный и стационарный – предлагались на экспорт. Один дивизион подвижного БРК закупил Вьетнам (поставка в 2010-м) и два – Сирия (поставка в 2011-м).
В конце 2009 – начале 2010 года два комплекса «Бастион» поступили на вооружение 25-го обрд 11-й обрабр (поселок Уташ Краснодарского края, близ Анапы).
Последний, третий комплекс (СПУ и другие машины) был получен в середине января 2011 года.
Выделен в отдельную батарею.
«Бал»
Оснащается дозвуковыми ракетами Х-35 «Уран» (Х-35Э, П-35Э). Мобильный вариант БРК «Бал-Э» принят на вооружение в 2008 году. ПУ – самоходная, 3С60 (в комплексе четыре СПУ), шасси – МЗКТ-7930. В состав БРК «Бал-Э» также входят два самоходных командных пункта управления и связи, четыре транспортно-перегрузочные машины, наземное оборудование.
С конца 1977 года в ОКБ «Звезда» разрабатывался дозвуковой противокорабельный комплекс Х-35 «Уран». Полномасштабные работы велись на основании постановлений Совета министров СССР № 635-188 от 5 июля 1981 года и № 222-90 от 16 марта 1983 года.
Испытания корабельного комплекса «Уран» начались в 1983-м на полигоне ЧФ Песчаная Балка. Из-за ряда задержек, обусловленных техническими, финансовыми и политическими факторами, был принят на вооружение лишь в 2003 году. На базе корабельного комплекса создан БРК «Бал-Э» (3К-60, 3М-60).
СПУ выполнена в виде установленной на штатные опорные точки автомобильного шасси сварной рамы. На раме помещен блок из восьми транспортно-пусковых контейнеров с ракетами. При переходе из походного положения в боевое гидросистема поднимает блок на стартовый угол +35 градусов. Время развертывания комплекса из походного в боевое положение – не более десяти минут, дальность стрельбы – до 120 километров.
В 2004 году были закончены государственные испытания опытного образца СПУ 3С60, после чего установку и остальное оборудование, хотя и без боекомплекта, передали 11-й обрабр Черноморского флота, дислоцированной в Анапе. В конце 2011-го две СПУ 3С60 поступили на вооружение Каспийской флотилии. 26 апреля 2012-го на полигоне Аданок в Дагестане была произведена первая стрельба с БРК «Бал». По мишеням, находившимся на якорях в 56 километрах от берега, запущены две ракеты П-35Э. По сообщению командования, обе ракеты поразили цели.
Следует заметить, что «Бал» и «Бастион» вовсе не дублируют, а дополняют друг друга. Ракета «Оникс» в три-четыре раза дороже Х-35.
В чем-то эта пара аналогична паре «Редут» – «Рубеж». Разумеется, и «Бал», и «Бастион» требуют доводки.
Специалисты считают, что в первую очередь данные БРК требуются для обороны Курильских островов, Сахалина и Камчатки. Острая необходимость, естественно, есть в них и на Кавказском побережье, и на Балтике.
Александр Широкорад
Опубликовано в выпуске № 42 (459) за 24 октября 2012 года
23.10.2012Права на данный материал принадлежат Военно-промышленный курьер
Материал был размещен правообладателем в открытом доступе.
Оригинал публикации
Противокорабельный ракетный комплекс П-800 «Оникс» (СССР) | Dogswar.ru
Сменилось уже несколько поколений противокорабельных крылатых ракет (ПКР). Отечественные ракетные комплексы «Оникс» и «Яхонт» с унифицированной ракетой относят к четвертому их поколению. Разработка комплекса противокорабельного ракетного оружия четвертого поколения началась в Центральном КБ машиностроения Министерства общего машиностроения (город Реутов), возглавляемом В.
Н. Челомеем, на рубеже 1970-1980-х годов. 5 июня 1981 года принято постановление СМ СССР о разработке нового комплекса. Задача ставилась масштабно — комплекс загоризонтной дальности с унифицированной сверхзвуковой ПКР, рассчитанной на надводный, подводный, наземный старт, с полностью автономной системой наведения.В 1982 году состоялась защита эскизного проекта. В основу была положена идея ампулизированной ракеты, поставляемой с завода-изготовителя в транспортно-пусковом контейнере (ТПК, именуется также «транспортно-пусковым стаканом») полностью готовой к старту, при этом массогабаритные характеристики должны обеспечить использование с пусковых установок различных носителей. Руководил разработкой комплекса генеральный конструктор Г. А. Ефремов, главными по направлениям были В. П. Царев, П. Я. Федоров, О. Я. Артамасов. Разработкой аппаратуры самонаведения занимался ленинградский ЦНИИ «Гранит» (главный конструктор В. Н. Яковлев), инерциального измерительного блока и датчиков угловой скорости — НПО электромеханики, маршевого двигателя — КБ «Пламя», разгонного двигателя — НПО «Искра», к натурным испытаниям привлекли НИИИС МАП, ЦАГИ.
В сентябре 1987 года проведен опытный пуск с малого ракетного корабля (МРК) проекта 1234.7, оборудованного пусковой установкой разработки КБСМ (главный конструктор В. Ф. Потапов) и корабельной аппаратурой системы управления разработки НПО «Гранит». В декабре 1990 года проведен пуск с подводной лодки проекта 670М. В июне 1998 года закончились государственные испытания комплекса «Оникс» с МРК проекта 1234.7 «Накат». Постановлением Правительства РФ от 23 сентября 2002 года ракетный комплекс П-800 «Оникс» принят на вооружение ВМФ России в составе МРК «Накат».
КОМПЛЕКС И РАКЕТА
Комплекс предназначен для поражения корабельных группировок или отдельных кораблей противника в условиях сильного радиоэлектронного и огневого противодействия. В его состав входят ПКР в ТПК, пусковые установки, корабельная аппаратура системы управления, наземное оборудование, средства погрузки. ПКР 3М55 выполнена по нормальной аэродинамической схеме со складным крестообразным крылом и оперением, носовым осесимметричным воздухозаборником с центральным телом.
Ракета оснащена комбинированной системой наведения с бортовой ЭВМ, «получающей» полетное задание перед пуском.
На большей части траектории управление полетом производится с помощью инерциальной автономной системы с высотомером, уточнение положения цели и самонаведение на нее на конечном участке — с помощью активно-пассивной радиолокационной головки самонаведения (РЛГСН) со сложным когерентным сигналом, адаптивной к помеховой обстановке. РЛГСН, аппаратура управления и боевая часть размещены в центральном теле диффузора воздухозаборника. Ракета вообще отличается весьма плотной компоновкой. Маршевый двигатель — жидкостной прямоточный воздушно-реактивный (ПВРД) тягой 4 т. Его запуск требует предварительного разгона ракеты, для этого в воздушном канале и камере сгорания ПВРД размещена твердотопливная стартово-разгонная двигательная установка (СРДУ). Боевая часть позволяет надежно поразить надводную цель типа «крейсер».
Пуск возможен при угле возвышения от 15 до 90°, то есть как из наклонных, так и из вертикальных пусковых установок. После выстрела ракеты из ТПК «минометным» способом СРДУ за несколько секунд разгоняет ее до сверхзвуковой скорости, после чего выбрасывается встречным потоком воздуха, и в работу вступает ПВРД. «Универсальность» ПКР заключается еще и в возможности выбора траектории полета. Полет по комбинированной траектории предполагает подъем до 14 км. На этой высоте ракета летит на большем участке траектории. Обнаружив цель с помощью РЛГСН, резко снижается до высоты 10-15 м — под нижнюю границу зоны корабельной ПВО, где она мало заметна для РЛС и оптоэлектронных систем. РЛГСН переходит в пассивный режим и вновь активизируется только перед атакой цели.
В режиме низковысотной траектории ракета летит на высоте нескольких десятков метров, что определяет меньшие скорость и дальность полета. Полет на предельно малой высоте и сверхзвуковые (порядка 2М) скорости уменьшают уязвимость ракеты от огневого воздействия противника. Программа системы наведения позволяет проводить классификацию и селекцию цели по заданным параметрам. При пуске нескольких ПКР залпом по групповой цели ракеты на конечном участке сами «распределяются» по целям. На базе П-800 НПО машиностроения разработало экспортную ПКР под девизом «Яхонт» для вооружения Вьетнама, Индонезии, Сирии. Известное обозначение для комплексов П-800 «Оникс»/«Яхонт» в США и НАТО — SS-N-26 Strobile. Во взаимодействии с авиационным КБ разработан авиационный вариант «Яхонта», при этом уменьшены масса и длина ракеты (в том числе — за счет уменьшения СРДУ).
Тактико-технические характеристики П-800 «Оникс»
Обозначение NATO SS-N-26
Длина, м 8
Размах крыла, м 1,7
Диаметр, м 0,7
Стартовый вес, кг 3000
Транспортно-пусковой стакан (ТПС) длина, м 8,9
диаметр, м 0,71
стартовая масса, кг 3900
Силовая установка
Маршевый двигатель СПВРД
Тяга, кгс (кН) 4000
Масса КС, кг 200
Стартово-разгонная ступень — твердотопливная
Масса СРС, кг ок 500
Летные данные
Скорость, М:
— на высоте 2,6
— у земли 2
Дальность пуска, км:
— по комбинированной траектории до 300
— по низковысотной траектории до 120
Высота полета, м:
— на маршевом участке 14000
— на низковысотной траектории 10-15
у цели 5-15
Система управления — с инерциальной системой навигации и радиолокационной ГСН
ГСН — дальность действия, км до 80
угол захвата цели, град +/- 45
время готовности, мин 2
Тип боеголовки — проникающая
Масса БЧ, кг 300
Боеготовность комплекса к пуску, мин 4
|
Опрос Праздники России Русский вопрос Еженедельная авторская телепрограмма К.  Затулина
Читайте также Реклама Видеооко Включай и смотри Партнёры |
Однако даже предшественник испытываемой гиперзвуковой ракеты — универсальный комплекс П-800 «Оникс» — до сих пор остается фактически непревзойденным и, более того, продолжает хранить свои секреты. Точные характеристики ракеты, в отличие от «Яхонта» — экспортной модификации ПКР — до сих пор не сообщаются, так как, по-видимому, составляют гостайну. А потому в Сети распространено устойчивое мнение, что «Оникс» может поразить противника на расстоянии не более чем в 300 километров. Однако данный параметр относится только к экспортному «Яхонту», дальность полёта которого ограничена рамками международного «Режима контроля за ракетными технологиями». В пользу этой цифры говорит и тот факт, что «Оникс» изначально разрабатывался в качестве малогабаритной замены сразу нескольким советским ПКР: «Гранит», «Малахит», «Москит». А, следовательно, имел и более лёгкую боевую часть, и уменьшенную дальность полета.
В теории можно предположить, что «Оникс» могли спроектировать в двух модификациях — со штатной разгонной ступенью и со ступенью увеличенной дальности. Последняя вполне могла устанавливаться на корабли дальней морской зоны и поражать цели на расстоянии свыше 800 километров. Эскадренный миноносец индийского флота «Раджпут» запускает еще одну экспортную вариацию «Оникса» — ПКР»Брамос».  Источник фото:ru.wikipedia.org/Автор: Indian Navy, CC BY 2.5 inПодобные характеристики индийской ПКР, прежде всего, свидетельствуют о получении Дели от России необходимых технологий, комплектующих и топлива, позволяющих добиться дальности в 600 километров для «Брамоса». Исходя из этого, логично предположить, что Москва вряд ли передала Индии максимум наработок по ПКР, которыми располагает. Что, в свою очередь, ещё раз подтверждает действительную дальность пуска «Оникса» на уровне 800 километров. Просмотреть все комментарии к новости
|
9 февраля — 118 лет назад началась Русско-японская война (1904 г.) Отражение (новый выпуск!) 13-му судоремонтному заводу ЧФ исполнилось 135 лет Православные праздники Газета ФГУП «13 СРЗ ЧФ» МО РФ Свежий выпуск |
|
Главный из них — максимальная дальность пуска.
В конструкции ракеты можно использовать более легкие материалы и оборудование, а также повысить запасы горючего и изменить его тип на более высокоэнергетичный. Кроме того, все эти меры позволят увеличить высоту маршевого полета «Оникса». Благодаря чему за счет снижения сопротивления воздуха и будет достигнута большая дальность полета.
Венгрия вновь воспользовалась своим правом вето
Условие полной международной изоляции России невыполнимоПротивокорабельная ракета CX-1 (Китай.
2014 год)В Китае создали клон российской противокорабельной ракеты, об этом сообщает сайт defence-blog.com. Согласно опубликованным фото с предстоявшего Международного авиасалона China International Aviation & Aerospace Exhibition 2014 в Чжухае будет представлен макет новой противокорабельной ракеты CX-1. Внешне новая ПКР сильно напоминает российскую разработку аналогичного типа под кодовым обозначением П-800 Оникс. Противокорабельная крылатая ракета П-800 «Оникс» предназначена для борьбы с надводными военно-морскими группировками и одиночными кораблями в условиях организованного огневого и радиотехнического противодействия. Возможно, также, применение по надводным и наземным радиоконтрастным целям …Ракета выполнена по нормальной аэродинамической схеме с трапециевидным складным крылом и оперением. Аэродинамика планера в сочетании с высокой тяговооруженностью обеспечивает высокую манёвренность (максимальный угол атаки-до 150 градусов), позволяющую ракете выполнять эффективные маневры уклонения от средств ПРО противника.
Ранее вооруженые силы Китая приоьрели несколько комплекс вооружения с ракетами П-800 «Оникс» для оснашения боевых кораблей. Стоит отметить, что в отличии от П-800 «Оникс» , новая китайская ракета CX-1 имеет значительно большие габариты и скорее всего предназначена для борьбы с целями типа «авианосец».
Источник — http://www.military-informant.com/
На авиасалоне 2014 года в Чжухае всеобщее внимание привлекла новая китайская сверхзвуковая крылатая ракета CX-1, сильно напоминающая российско-индийский BrahMos (а если точнее — российскую ракету «Оникс»/»Яхонт»). С российско-индийской системой CX-1 роднит не только внешний вид, но и концепция применения, в соответствии с которой, на основе этой ракеты будут созданы системы для разных видов вооруженных сил. В частности, в качестве базовых заявляются противокорабельный вариант ракеты и «армейский» вариант для стрельбы по наземным целям. Ракета может размещаться как на наземных мобильных ПУ, так и на боевых кораблях.
И сухопутная, и морская модификации, согласно заявлениям производителя, имеют дальность стрельбы от 40 до 280 км.
Для морской версии заявляется вероятность попадания в одиночный корабль не менее 0,75, для сухопутной указана КВО менее 20 м. По заявлению разработчиков, ракета способна развивать скорость 2,4М на малых высотах и 2,8-3М на больших высотах. CX-1 должна двигаться к цели по переменной траектории, меняя высоту полета от 5-20 м до 15-18 км. «Армейская» версия ракеты должна стать частью «универсальной армейской тактической ударной системы». Данная система построена по модульному принципу, включает в себя три типа боевых машин (самоходная ПУ, транспортно-заряжающая машина, машина управления) и будет способна применять, помимо ракеты CX-1, баллистическую ракету малой дальности М20, а также неуправляемые и корректируемые ракеты к тяжелым РСЗО А-100, А-200, А-300.
Пожалуй, самым интересным в проекте CX-1 и «ударной системы» является компания-исполнитель. В целом, до настоящего момента в сфере производства тактического и стратегического ракетного оружия в Китае ведущие позиции занимает ракетно-космический концерн CASIC.
Производство наиболее сложных видов крылатых ракет (как противокорабельных, так и крылатых ракет средней альности) сконцентрировано в Третьей академии CASIC.Однако данную продукцию представил конкурирующий с ним концерн CASC, который в последние годы был меньше представлен на оружейном рынке, но выполнял основной объем работ в рамках китайской космической программы. Непосредственным разработчиком КР CX-1 является Первая академия CASC, известная также как Китайская академия технологии ракет-носителей (CALT). CALT — главный разработчик китайских жидкостных ракет-носителей, а также китайских жидкостных баллистических ракет, это одна из мощнейших компаний китайской оборонной промышленности. Но в программах производства крылатых ракет CALT замечена не была. Побочным продуктом компании являются тяжелые РСЗО (300-мм А100 и ее варианты).
Таким образом, речь идет о попытке крупной и мощной китайской военно-промышленной компании пробить себе путь на новый для нее сегмент оружейного рынка, серьезно потеснив своего основного конкурента — концерн CASC.
А учитывая тот факт, что CX-1 уже находится в стадии летных испытаний, можно предположить, что в проект вложены значительные материальные и кадровые ресурсы.Источник — http://bmpd.livejournal.com/
П-800 Оникс и Яхонт — противокорабельные ракеты среднего радиуса действия
ПКР «Оникс» была разработана в НПО Машиностроения в конце 80-х гг. для вооружения боевых кораблей различного тоннажа. Она предназначалась для поражения морских целей, следующих в группе с учетом их приоритета. При этом целеуказание могло выполняться с борта Ка-25Ц, ТУ-95РЦ или ИСЗ системы «Легенда»
Видео запуска ракеты «Яхонт» с (ПБРК) «Бастион»
Алгоритм применения ракеты выглядит следующим образом. Старт осуществляется при помощи РДТТ, который разгоняет ракету до скорости, на которой возможен запуск маршевого СПВРД, обеспечивающего длительный полет на скорости, соответствующей М=2,5.
На первом участке полета, который проходит на большой высоте, управление осуществляется бесплатформенной инерциальной системой. После выхода в район цели ракета пикированием переходит на малую высоту, где включается активно-пассивная РГСН, которая обнаруживает цели (в пассивном режиме она может работать не только по сигналам корабельных РЛС, но и с использованием других работающих в это время на борту корабля-цели радиосистем — связных, навигационных, РЭП и т.п.). Затем ГСН выключается, и ракета сближается с группой кораблей противника в режиме «тихого» полета. На завершающем этапе РГСН снова включается, производит выделение ложных целей и по отраженному сигналу самостоятельно определяет приоритет каждой и выбирает основную с помощью бортового компьютера.
Изначально ракета предназначалась для эксплуатации в герметичном и закрытом транспортно-пусковом контейнере, что определило ее малые размеры и складывающееся крыло и оперение.
На авиасалоне Жуковский’99 был представлен авиационный вариант ракеты «Яхонт» (экспортное обозначение), предназначенный для вооружения самолетов Ту-142М (МЭ), Су-ЗОМКИ, Су-27ИБ (вариант с комплексом вооружения «Морской Змей» и его экспортное исполнение Су-32ФН), а также гораздо более легкого истребителя-бомбардировщика МиГ-29М (МиГ-33), оснащенного РЛС, способной выделять морские цели и центральным спецпилоном.
Авиационная ПКР «Яхонт» отличается от базового варианта системой крепления на АКУ, наличием обтекателя, прикрывающего лобовой воздухозаборник ПВРД и стекателя. Обтекатель и стекатель сбрасываются перед пуском. Конструкция ракеты предусматривает длительное хранение в негерметичном контейнере, тогда как базовый вариант хранится в среде нейтрального газа.
Поступление ракеты на вооружение ВВС РФ при наличии финансирования ожидается после 2001 г. Кроме того, она предложена на экспорт во всех вариантах и первым заказчиком стал Китай (вариант корабельного старта). Авиационной модификацией могут оснащаться самолеты Су-27СК, Су-30МКИ, Су-32ФН, МиГ-29СМТ и Ту-142МЭ, предлагаемые на экспорт, или другие машины, уже имеющиеся у потенциальных клиентов.
Тактико-технические характеристики крылатой ракеты «Оникс» , «Яхонт»
| Дальность стрельбы максимальная, км | 300 |
| Высота полета, м | 5-15000 |
| Скорость полета, м/с | 750 |
| Система управления | инерциальная с РГСН |
| Стартовая масса ракеты, кг | 2500 (авиационная), 3000 (корабельная) |
| Масса, кг | 3900 — в ТПК |
| Боевая часть: тип/масса, кг | проникающая/до 300 |
Тестирование на COVID и экспресс-тестирование рядом со мной в Ониксе, Калифорния
Последние обновления тестирования на COVID -19 вакцина для детей от 6 месяцев до 5 лет.
Те, кто знаком с ситуацией, сообщают, что вакцина для детей до 5 лет может быть доступна к концу февраля (Washington Post)19 января 2022 г. волна высокоинфекционного варианта может стихнуть так же быстро, как и пришла.
19 января 2022 г.
Три отдельных лабораторных исследования показывают, что Paxlovid, таблетка от COVID от Pfizer, эффективна против варианта Omicron, несмотря на его мутации (Wall Street Journal) тестовые наборы и будут отдавать приоритет поставкам американцам с почтовых индексов, в которых наблюдается высокий уровень заболеваемости и смертности от COVID-19, причем первые 20% ежедневных заказов отправляются в эти районы. (NPR)11 января 2022 г.
Администрация Байдена объявила в понедельник, что страховые компании и планы медицинского страхования будут обязаны покрывать восемь бесплатных безрецептурных домашних тестов на каждого застрахованного лица в месяц.Например, семья из четырех человек, пользующихся одним и тем же планом, сможет пройти до 32 таких тестов, покрываемых их планом медицинского страхования, в месяц.
(NPR)
11 января 2022 г.
Центры США по контролю и профилактике заболеваний и Государственный департамент США в понедельник рекомендовали воздержаться от поездок в соседнюю Канаду из-за роста числа случаев COVID по мере распространения варианта омикрон. (Новости NBC)
11 января 2022 г.
Всплеск, вызванный омикронами, вызвал стремительный рост числа госпитализаций с COVID-19 по всей территории США.S., достигнув на этой неделе нового пика пандемии, когда было госпитализировано 145 982 пациента. Пациенты с COVID в настоящее время занимают около 30% коек отделения интенсивной терапии в стране. (NPR)
4 января 2022 г.
По данным Университета Джона Хопкинса, почти у 1 из 100 американцев только за последнюю неделю был положительный результат на вирус. Только в понедельник в США было зарегистрировано более 1 миллиона случаев, что является самым высоким показателем за время пандемии. (USA Today)
4 января 2022 г.
На вариант Omicron приходилось более 95% всех новых случаев COVID-19, зарегистрированных на прошлой неделе, закончившейся субботой, по сравнению с 77% и 38% за предыдущие две недели.
соответственно.(CDC)
3 января 2022 г.
Согласно FDA, «предварительные данные свидетельствуют о том, что тесты на антиген действительно обнаруживают вариант омикрон, но могут иметь пониженную чувствительность», ссылаясь на результаты предварительного лабораторного исследования, опубликованного 28 декабря. Это означает, что больше ложноотрицательных результатов возможны тесты на антигены, особенно на ранних стадиях заболевания.
3 января 2022 г.
Вариант коронавируса Omicron лучше обходит иммунитет вакцинированных людей, чем вариант Delta, согласно датскому исследованию, опубликованному на прошлой неделе, которое помогает объяснить, почему Omicron распространяется быстрее.(Reuters)
28 декабря 2021 г.
Несмотря на распространение варианта Omicron, уровень вакцинации в США составляет всего 62%, при этом наименее вакцинированные округа остаются неизменными (NY Times)
28 декабря 2021 г.
CDC сократить количество времени, которое рекомендуется людям изолировать после положительного результата теста на COVID-19, с 10 дней до 5.
Представители здравоохранения также сократили количество времени, в течение которого человек должен находиться в карантине после контакта с кем-то, у кого положительный результат теста.(USA Today)
28 декабря 2021 г.
Рост числа случаев заболевания COVID-19 привел к тому, что авиакомпании отменили более 1000 рейсов в понедельник, что побудило доктора Энтони Фаучи, ведущего эксперта по инфекционным заболеваниям США, предложить правительству рассмотреть возможность введения обязательных вакцин для внутренних рейсы. (Reuters). не будут широко доступны в течение «месяцев» (Forbes)
17 декабря 2021 г.
Центры по контролю и профилактике заболеваний сузили использование вакцины J&J, официально рекомендуя вакцины Pfizer и Moderna, когда они доступны.Рекомендация следует за растущими опасениями по поводу редких тромбов, связанных с вакциной J&J.
16 декабря 2021 г.
Соединенные Штаты стоят на пороге превышения 800 000 смертей от вируса, причем 600 000 из них — люди в возрасте 65 лет и старше. Фактически, один из 100 пожилых американцев умер от вируса. Фактически, 1 из 100 пожилых американцев умер от вируса. (Нью-Йорк Таймс)
16 декабря 2021 г.
CDC предупредил, что быстро распространяющийся вариант Omicron может вызвать волну наказания COVID-19 уже в январе, указывая при этом, что существующая схема вакцинации плюс бустеры эффективны для защиты от серьезных заболеваний. и смерть.(Washington Post)
12 декабря 2021 г.
Omicron может потребоваться четвертая доза вакцины раньше, чем ожидалось, сообщает Pfizer (Washington Post)
7 декабря 2021 г.
Исследователи в Южной Африке, где распространяется вариант Omicron COVID-19 быстро, говорят, что это может вызвать менее серьезные случаи COVID, чем другие формы вируса, но неясно, будет ли это так. (NY Times)
1 декабря 2021 г.
По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), вариант Omicron COVID-19 в настоящее время выявлен как минимум в 24 странах, включая Соединенные Штаты, причем первый зарегистрированный случай был выявлен в Калифорния.
(NPR, New York Times)
29 ноября 2021 г.
Всемирная организация здравоохранения предупреждает, что новый омикронный вариант коронавируса представляет «очень высокий» глобальный риск из-за возможности его более легкого распространения и устойчивости к вакцинам. и иммунитет у людей, инфицированных предыдущими штаммами. (NPR)
28 ноября 2021 г.
Врач из Южной Африки говорит, что пациенты с вариантом Omicron имеют «очень легкие» симптомы (Reuters)
19 ноября 2021 г. в возрасте 18 лет и старше для вакцин Pfizer и Moderna.CDC примет окончательное решение в пятницу.
5 ноября 2021 г.
Противовирусные таблетки Pfizer снижают риск госпитализации и смерти от COVID-19 у людей из групп высокого риска на 89 процентов, как показывает исследование компании. Защитный эффект был настолько убедительным, что независимая комиссия, наблюдавшая за испытанием препарата, рекомендовала прекратить его досрочно. (Washington Post)
3 ноября 2021 г.
CDC официально рекомендовал педиатрическую дозу вакцины Pfizer COVID-19 для детей в возрасте от 5 до 11 лет, открыв двери для вакцинации 28 миллионов детей в США.
Это решение следует за «устойчивым» ответом антител и «благоприятными» результатами безопасности у детей, которые получали двухдозовый режим в клинических испытаниях. (CDC, NPR)
29 октября 2021 г.
FDA разрешило использование в чрезвычайных ситуациях (EUA) вакцины Pfizer-BioNTech для детей от 5 до 11 лет. Эксперты говорят, что прививка может принести облегчение родителям, беспокоящимся о том, что их дети заболеют, хотя некоторые опасаются, что те, кто подвергается наибольшему риску, могут ускользнуть. (NY Times)
26 октября 2021 г.
Консультативная группа FDA единогласно рекомендовала низкодозовую вакцину Pfizer против COVID для детей в возрасте от 5 до 11 лет.Это одобрение стало важным шагом в защите большего числа детей в США от вируса. Агентство не всегда следует советам своего независимого комитета, но часто делает это. (CNBC)
21 октября 2021 г.
Для лиц, получивших вакцину Pfizer-BioNTech или Moderna против COVID-19 не менее 6 месяцев назад, следующие группы имеют право на повторную прививку от COVID: (1) 65 лет и старше, ( 2) в возрасте 18 лет и старше, которые живут в учреждениях длительного ухода, (3) в возрасте 18 лет и старше, у которых есть сопутствующие заболевания, и (4) в возрасте 18 лет и старше, которые работают или живут в условиях повышенного риска.
Людям, получившим вакцину Johnson & Johnson против COVID-19, ревакцинация также рекомендуется для лиц старше 18 лет, которые были вакцинированы два или более месяцев назад. (CDC)11 октября 2021 г.
Спрос на экспресс-тесты на COVID на дому был высоким, и покупатели находят либо пустые полки в аптеках, либо получают сообщения «нет в наличии» в Интернете, поскольку компании спешат удовлетворить спрос (WHYY / NPR)
7 октября 2021 г.
Лос-Анджелес потребует от жителей и посетителей предъявить доказательство вакцины против COVID-19, чтобы есть, пить или делать покупки в закрытых заведениях по всему городу.В соответствии с этим мандатом, подходящие посетители должны будут предъявить доказательство вакцинации против COVID-19, чтобы войти в рестораны, бары, кафе, магазины, спортивные залы, спа-салоны или салоны. Люди, посещающие крупные мероприятия на открытом воздухе, также должны будут предъявить доказательства либо вакцинации, либо доказательства отрицательного теста на COVID-19, чтобы посетить мероприятие.
Он должен вступить в силу где-то в ноябре. (NPR)
7 октября 2021 г.
Начиная с 30 октября правительство Канады потребует, чтобы все авиапассажиры и пассажиры межпровинциальных поездов были вакцинированы против COVID-19.(USA Today)
7 октября 2021 г.
В четверг компания Pfizer обратилась к правительству США с просьбой разрешить использование ее вакцины против COVID-19 у детей в возрасте от 5 до 11 лет, официально подав заявку в FDA. Если регулирующие органы согласятся, выстрелы могут начаться в течение нескольких недель. (AP)
6 октября 2021 г.
Администрация Байдена в среду объявила о новых инвестициях в размере 1 миллиарда долларов в домашние тесты на коронавирус, которые в четыре раза увеличат национальные запасы этих экспресс-тестов к началу декабря, заявили официальные лица.(USA Today)
1 октября 2021 г.
Около трети родителей говорят, что хотят вакцинировать своих детей в возрасте от 5 до 11 лет «немедленно», как только вакцина против коронавируса будет доступна для этой возрастной группы, по данным отчет Фонда семьи Кайзер.
(Washington Post)
28 сентября 2021 г.
Pfizer отправляет данные в FDA, запрашивая разрешение на экстренное использование (EUA) для своей вакцины против COVID-19 для детей в возрасте от 5 до 11 лет Этим детям младшего возраста можно будет сделать прививку к Хэллоуину, говорит генеральный директор Pfizer.(NBC News)
27 сентября 2021 г.
Пандемия COVID стала самой смертоносной вспышкой в истории Америки. Согласно данным Университета Джона Хопкинса, 681 253 человека в США умерли от COVID-19, при этом примерно 675 000 человек умерли во время пандемии гриппа 1918 года. (Smithsonian)
24 сентября 2021 г.
Центры по контролю и профилактике заболеваний (CDC) объявили рекомендации по повторным прививкам и тем, кто должен их получать: (1) Люди в возрасте 65 лет и старше и лица, проживающие в учреждениях длительного ухода, должны получить повторную прививку вакцины Pfizer-BioNTech против COVID-19 не менее чем через 6 месяцев после первичной серии вакцин Pfizer-BioNTech, (2) Люди в возрасте 50–64 лет.
с сопутствующими заболеваниями, должны получить повторную прививку вакцины Pfizer-BioNTech против COVID-19 не менее чем через 6 месяцев после первичной серии Pfizer-BioNTech (3). Люди в возрасте 18–49 лет с сопутствующими заболеваниями могут получить повторную прививку Pfizer-BioNTech. Вакцина BioNTech против COVID-19 не менее чем через 6 месяцев после их первичной серии Pfizer-BioNTech, в зависимости от их индивидуальных преимуществ и рисков, и (4) люди в возрасте 18–64 лет, которые подвергаются повышенному риску заражения и передачи COVID-19 из-за профессиональной деятельности. или учреждения могут получить повторную прививку вакциной Pfizer-BioNTech против COVID-19 не менее чем через 6 месяцев после их первичной серии Pfizer-BioNTech, в зависимости от их индивидуальных преимуществ и рисков.23 сентября 2021 г.
FDA выдало разрешение на экстренное использование (EUA) бустерной дозы вакцины Pfizer против COVID-19 для людей в возрасте 65 лет и старше, людей с высоким риском тяжелого заболевания и людей, чья работа связана с риском инфекционное заболевание.
(CNN)
20 сентября 2021 г.
Pfizer сообщает, что низкая доза их вакцины против COVID безопасна и эффективна для детей в возрасте от 5 до 11 лет, и запрашивает разрешение на экстренное использование, поскольку они продолжают накапливать данные для поддержки заявки на полное одобрение в дети.(Washington Post)
14 сентября 2021 г.
Высокопоставленные чиновники здравоохранения США считают, что вакцина Pfizer от COVID-19 может быть разрешена для детей в возрасте 5–11 лет к концу октября (Reuters)
9 сентября 2021 г.
Президент Байден и Министерство труда США издадут правило, требующее, чтобы предприятия с более чем 100 сотрудниками еженедельно вакцинировали или тестировали своих работников, заявили официальные лица в четверг.
9 сентября 2021 г.
Власти ожидают в этом году активный сезон гриппа, что угрожает больницам, которые уже с трудом справляются со штаммами COVID-19.Есть надежда, что вакцины против COVID и гриппа снизят количество случаев заболевания этой зимой.
(Wall Street Journal)8 сентября 2021 г.
Инфраструктура тестирования COVID-19 на национальном уровне изо всех сил пытается не отставать от спроса на вариант Delta. Президент Байден рассмотрит ситуацию, изложив следующий этап федеральных ответных мер на пандемию.
7 сентября 2021 г.
Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ): COVID-19, вероятно, «сохранится», поскольку вирус продолжает мутировать подобно пандемическим вирусам гриппа.(CNBC)23 августа 2021 г.
Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США официально одобрило вакцину Pfizer-BioNTech против COVID-19
19 августа 2021 г.
ранее наблюдалось в ноябре 2020 года. Центры неотложной помощи снова находятся на переднем крае оказания помощи и испытывают рекордно большое количество пациентов.
17 августа 2021 г.
Вакцина против гриппа может снизить риск тяжелого течения COVID-19. Исследователи изучили почти 75 000 пациентов с COVID-19, половина из которых получила самую последнюю доступную прививку от гриппа.
15 августа 2021 г.
CDC сообщает, что с начала пандемии COVID-19 вызвал больше детских смертей, чем грипп.
13 августа 2021 г.
В детских больницах наблюдается всплеск случаев РСВ, поскольку дельта-вариант COVID-19 сохраняется, сезон гриппа приближается.
4 августа 2021 г.
По данным Центров по контролю и профилактике заболеваний (CDC), на вариант Delta в настоящее время приходится около 93% всех случаев COVID-19 в США.
3 августа 2021 г.
Среднее число случаев заболевания COVID в США за семь дней.S. превзошел пик, наблюдавшийся прошлым летом, когда в стране не было разрешенной вакцины, сказала директор CDC доктор Рошель Валенски. В пятницу, 30 июля, по всей стране было зарегистрировано 72 790 новых случаев заболевания COVID.
27 июля 2021 г.
Калифорния требует доказательства вакцинации против COVID-19 или регулярного тестирования для всех государственных служащих и медицинских работников. Кроме того, некоторые рестораны и бары Сан-Франциско скоро потребуют подтверждения вакцинации перед входом.
9 июля 2021 г.
В текущем руководстве CDC говорится, что полностью вакцинированные люди могут воздерживаться от планового тестирования на COVID, однако некоторые эксперты задаются вопросом, должен ли этот подход измениться, учитывая распространение нового варианта Delta.
7 июля 2021 г.
Дети обнаружили манипулятивный метод создания ложноположительных тестов на COVID с помощью безалкогольных напитков, чтобы не ходить в школу.
14 мая 2021 г.
Target, Home Depot, CVS и Harris Teeter входят в число сетей, которые по-прежнему будут требовать наличия масок в магазинах, хотя они пересматривают новые рекомендации CDC и пересматривают правила работы магазинов.
14 мая 2021 г.
Walmart, крупнейший в стране ритейлер, заявляет, что полностью вакцинированные сотрудники и покупатели не должны будут носить маску в магазинах начиная со вторника, исходя из последних указаний CDC.
13 мая 2021 г.
CDC: если вы полностью вакцинированы против COVID-19, вы можете возобновить деятельность без ношения маски или соблюдения дистанции 6 футов, за исключением случаев, когда это требуется федеральными, государственными, местными, племенными или территориальными законами, в т.
ч. . руководство по местному бизнесу и работе.
27 апреля 2021 г.
CDC во вторник упростил правила ношения масок для американцев, отметив, что многие мероприятия на свежем воздухе теперь безопасны без маски после значительного прогресса в вакцине против COVID-19 и сокращения новых ежедневных случаев заболевания по всей стране.
26 апреля 2021 г.
Вдохновленный результатами пилотной программы в 11 округах, штат Калифорния в настоящее время расширяет доступ, чтобы покрыть расходы любого школьного округа или чартерной школы на экспресс-диагностику Covid-тестирования учащихся и сотрудников в течение лета и скорее всего осенью.
26 апреля 2021 г.
По состоянию на воскресенье, 25 апреля, в Вирджинии зарегистрировано 654 210 случаев заболевания COVID-19, включая подтвержденные лабораторные тесты и клинические диагнозы, согласно данным Министерства здравоохранения Вирджинии.Это общее количество отражает увеличение на 884 случая с субботы. Министерство здравоохранения Вирджинии сообщает о 6,1% 7-дневных положительных результатов для общего числа тестов и 5,5% 7-дневных положительных результатов для ПЦР-тестов.
В воскресенье было зарегистрировано 16 дополнительных смертей, в результате чего число погибших составило 10 691 человек.
22 апреля 2021 г.
Более 86 миллионов взрослых в США в настоящее время полностью вакцинированы, сделано более 200 миллионов прививок, но эксперты опасаются, что энтузиазм в отношении получения вакцины может упасть, и многие американцы могут слишком захотеть снять свои маски .
6 апреля 2021 г.
Эпидемиологи и другие эксперты в области общественного здравоохранения обсуждают, следует ли использовать экспресс-тесты на COVID-19 в качестве входных билетов в школы, на предприятия, в развлекательные и спортивные учреждения. Даже с учетом ускорения темпов вакцинации пройдут месяцы, прежде чем все американцы, желающие получить вакцины от COVID-19, получат их. В результате тестирование может стать повсеместным требованием для студентов, офисных работников, зрителей и посетителей, желающих собраться в помещении.
3 апреля 2021 г.
Предоставляя все больше свидетельств того, что пандемия ослабляет свою власть над регионом, округ Лос-Анджелес впервые с марта 2020 года опустился ниже 600 госпитализаций, связанных с коронавирусом, сообщили в пятницу представители общественного здравоохранения штата.
3 апреля 2021 г.
В пятницу представители органов здравоохранения Калифорнии объявили об изменениях, которые позволят возобновить мероприятия в помещении, такие как концерты, конференции и театральные представления, а также вернуть болельщиков на спортивные мероприятия в закрытых помещениях при условии одобрения местных органов здравоохранения. которым разрешено в каждом округе вводить более строгие правила, чем позволяет штат. Новые правила вступят в силу 15 апреля.
2 апреля 2021 г.
Представители органов здравоохранения округа Гумбольдт призывают жителей продолжать проходить тестирование на COVID.Тестирование в округе Гумбольдт предлагается бесплатно семь дней в неделю (с 7:00 до 19:00) в Redwood Acres в Юрике, а также доступно в различных местах по всему округу каждый будний день. На всех сайтах приветствуются посетители, а время обработки результатов составляет в среднем от 48 до 72 часов.
2 апреля 2021 г.
Представители органов здравоохранения в Сан-Хосе — крупнейшем округе области залива — говорят, что они наблюдают резкое сокращение количества тестов на COVID-19.
Они также напоминают публике дважды подумать, прежде чем собираться большими группами в эти праздничные выходные.
1 апреля 2021 г.
FDA одобрило два новых безрецептурных теста на COVID: тесты Abbott BinaxNOW и Quidel Quickvue вскоре будут доступны в аптеках в упаковках по две штуки по цене от 15 до 20 долларов.
31 марта 2021 г.
Д-р Рошель Валенски, директор CDC: «Вакцинированные люди не переносят вирус — они не болеют». Валенски имел в виду новое исследование CDC, которое предполагает, что люди, полностью привитые вакцинами, произведенными Moderna и Pfizer, не передают вирус.
Показать большеМультиплексирование платформы Onyx делает возможным мутагенез полного насыщения белка
Представьте себе: вы хотите исследовать свое любимое биологическое явление и начинаете со стратегии скрининга, которая приводит к ряду значительных совпадений. Поздравляю!
Затем вы расставляете эти хиты по приоритетам и выбираете свой любимый белок, который плохо охарактеризован.
Теперь ваша жизненная миссия состоит в том, чтобы полностью охарактеризовать этот белок. Вы знаете, что он участвует в процессе, который вы проверяли, но как? Выполняет ли этот белок каталитическую функцию? И если да, то где находится каталитический центр и какие остатки задействованы?
Чтобы выяснить это, вы решаете случайным образом мутагенизировать ассоциированный ген с помощью ПЦР.Но подверженная ошибкам ПЦР является случайной, и у вас нет возможности контролировать, какие мутации вы введете. Доступное вам мутационное пространство также весьма ограничено, обычно до одной мутации на кодон. Например, для остатка лизина введение только одной точечной мутации позволяет заменить шесть различных аминокислот, а это означает, что остальные 13 недоступны для тестирования.
В идеальном мире вы должны систематически нацеливаться на весь свой белок, чтобы убедиться, что вы проверили все остатки.Вы замените каждый остаток всеми разными аминокислотами, потому что некоторые аминокислотные замены ведут себя совершенно по-другому, для полного мутагенеза насыщения вашего белка.
Но это много мутаций: 19, чтобы насытить только одну позицию. Для цельного белка количество мутаций будет в 19 раз больше длины вашего белка, а это означает, что даже для коротких белков количество мутаций легко превышает 2000.
Кажется, непонятное упражнение. Но благодаря высокопроизводительным возможностям редактирования CRISPR настольной платформы Onyx, которая параллельно генерирует тысячи мутаций, это теперь в пределах возможного.
Лизелот Девахтер, работавшая над изучением устойчивости к антибиотикам в лабораториях профессора Яна Михельса из Университета Левена, Бельгия, и профессора Яна-Виллема Вининга из Университета Лозанны, Швейцария, провела испытания Onyx, выбрав четыре белки, участвующие в синтезе клеточной оболочки E.coli : LPXa, LPXc, MurA, FabZ.
Как она объяснила на недавнем вебинаре Labroots, , она выбрала белки отчасти потому, что они представляют собой смесь более и менее хорошо охарактеризованных белков, а это означает, что в литературе имеется информация, которую она могла бы использовать для подтверждения своих выводов.
Она также надеялась сделать несколько новых открытий о клеточной оболочке, которая является главной мишенью для антибиотиков.
«Нам срочно нужны новые соединения для борьбы даже с самыми устойчивыми бактериями. И в этом контексте прилагаются большие усилия для обнаружения ингибиторов в основном LPXa и LPxC. Поэтому мы хотим полностью охарактеризовать эти белки и попытаться помочь этим усилиям», — сказал Девахтер.
Что она нашла?
Она действительно смогла создать библиотеки мутагенеза с насыщением и идентифицировать остатки, участвующие в катализе белка LPXc и в связывании субстрата.Но она также сделала несколько неожиданных открытий.
«Раньше я думал о белках как о молекулярных машинах, которые были доведены до совершенства миллионами лет эволюции, и что даже малейшее изменение снизит эффективность этого белка. Но, возможно, это был какой-то наивный взгляд».
Нанеся на график часть информации, полученной от Оникса, Девахтер по-новому, она также должна была убедиться, что это не так — в целых 40% позиций присутствующая аминокислота могла быть заменена любой, или, по крайней мере, все, кроме одной, другой аминокислоты.
«Для меня это было довольно неожиданно, и это подчеркивает высокую гибкость, которую имеет любая позиция в толерантности к аминокислотам», — сказал Девахтер.
Подробную презентацию смотрите здесь.
Частная аренда — Оникс
Часто задаваемые вопросы
Как заказать частную аренду?
Перейдите по ссылке выше, которая приведет вас на нашу платформу для продажи билетов, и выберите день и время, когда вы хотели бы взять автомобиль напрокат. После того, как вы пройдете процесс оформления заказа, у вас будет возможность выбрать фильм, который вы хотите забронировать для проката, и немедленно произвести оплату.
Требуется ли подтверждение вакцинации против COVID-19 для частной аренды?
The Onyx Theatre требует подтверждения полной вакцинации от COVID-19 (или отрицательного результата теста) перед входом в любую частную аренду.
Мы принимаем любое из следующего:
— ваша физическая карта, подтверждающая полную вакцинацию
— четкая, разборчивая фотография вашей карты вакцинации
— цифровая карта вакцинации
— отрицательный результат теста на COVID-19 (тест ПЦР должен быть сделан в течение 72 часов до запланированной аренды , или отрицательный результат экспресс-теста за 24 часа аренды)
Вас также попросят предъявить удостоверение личности с фотографией вместе с подтверждением вакцинации.
Они необходимы для входа, так что, пожалуйста, подготовьтесь.
Нужны ли маски?
Да, маски обязательны для всех зрителей в здании, в том числе на вашем месте, когда вы не едите и не пьете. Наши сотрудники также будут в масках.
Вы будете продавать концессии?
У нас будет свежеприготовленный попкорн, конфеты, пиво/вино/сидр и безалкогольные напитки. Никакая посторонняя еда или напитки не будут разрешены.
Что делать, если мне нужно отменить?
Отмены или отсрочки, связанные с COVID-19, будут разрешены.Если у вас или у кого-то из вашей группы проявляются симптомы, если вы контактировали с кем-то, у кого есть COVID-19, или вам было приказано отправиться на карантин, пожалуйста, сообщите нам об этом как можно скорее. Мы с радостью вернем вам деньги или перенесем вашу аренду.
Когда мы должны прибыть на наш скрининг?
Мы рекомендуем всем гостям приходить как минимум за десять минут до назначенного времени аренды.
Мы начнем кино вовремя, поэтому, пожалуйста, постарайтесь не опоздать.
Можно ли приобрести закрытый сеанс в подарок?
Абсолютно! Пожалуйста, свяжитесь с нами для получения более подробной информации о том, как это организовать: info@theonyxtheatre.ком
Какие фильмы доступны для частного проката
NO TIME TO DIE и DUNE будут доступны для аренды с 22 октября по 4 ноября.
Протокол
— Протоколы GEN
использованная литература
1. Сандберг, Т.Е., Салазар, М.Дж., Венг, Л.Л., Палссон, Б.О., и Файст, А.М. (2019). Появление адаптивной лабораторной эволюции как эффективного инструмента для биологических
открытий и промышленной биотехнологии.Метаб. англ. 56, 1–16.
2. Гиавер Г., Флаэрти П., Кумм Дж., Проктор М., Нислоу К., Джарамилло Д.Ф., Чу А.М., Джордан М.И., Аркин А.П. и Дэвис Р.В.
2004). Хемогеномное профилирование:
выявление функциональных взаимодействий малых молекул в дрожжах. проц. Натл. акад. науч. США 101, 793–798.
3. Гиргис, Х.С., Хоттес, А.К., и Тавазои, С. (2009). Генетическая архитектура внутренней чувствительности к антибиотикам. PloS One 4, e5629.
4. Шепелин Д., Хансен, А.С.Л., Леннен, Р., Луо, Х., и Херргард, М.Дж. (2018). Выбор лучшего: эволюционная инженерия химического производства в микробах. Гены 9.
5. Гарст, А.Д., Бассало, М.К., Пайнс, Г., Линч, С.А., Халвег-Эдвардс, А.Л., Лю, Р., Лян, Л., Ван, З., Зейтун, Р., Александр, В.Г., и соавт. (2017). Полногеномное картирование мутаций с разрешением в один нуклеотид для белковой, метаболической и геномной инженерии. Нац. Биотехнолог. 35, 48–55.
6. Жа Ю., Муилвейк Б., Кулер Л., Пунт, П. Дж. (2012) Ингибирующие соединения в гидролизатах лигноцеллюлозной биомассы во время процессов ферментации гидролизата. J Биопроцесс Биотехник 2:1.
7. http://parts.
igem.org/Promoters/Catalog/Anderson
8. Hillenmeyer, ME, Fung, E., Wildenhain, J., Pierce, SE, Hoon, S., Lee, W. , Proctor, M., St Onge, RP, Tyers, M., Koller, D., et al. (2008). Химический геномный портрет дрожжей
: раскрытие фенотипа для всех генов. Наука 320, 362–365.
9.Ли, К., Ким, И., Ли, Дж., Ли, К.-Л., Мин, Б., и Парк, К. (2010). Транскрипционная активация альдегидредуктазы YqhD с помощью YqhC и ее участие в метаболизме глиоксаля Escherichia coli K-12. Дж. Бактериол. 192, 4205–4214.
10. Миллер, Э.Н., Джарбо, Л.Р., Тернер, П.С., Фаркья, П., Йомано, Л.П., Йорк, С.В., Нанн, Д., Шанмугам, К.Т., и Ингрэм, Л.О. (2009). Фурфурол ингибирует рост, ограничивая ассимиляцию серы в этанологенном штамме Escherichia coli LY180. заявл. Окружающая среда.микробиол. 75, 6132–6141.
11. Ван, X., Йомано, Л.П., Ли, Дж.Ю., Йорк, С.В., Чжэн, Х., Маллинникс, М.Т., Шанмугам, К.Т., и Ингрэм, Л.О. (2013). Разработка устойчивости к фурфуролам у Escherichia coli улучшает ферментацию лигноцеллюлозных сахаров в возобновляемые химические вещества.
проц. Натл. акад. науч. США 110, 4021–4026.
12. Паттрик, К.А., Уэбб, Дж.П., Грин, Дж., Чаудхури, Р.Р., Коллинз, М.О., и Келли, Д.Дж. (2019). Протеомное профилирование, моделирование факторов транскрипции и геномика эволюционировавших толерантных штаммов объясняют механизмы токсичности ванилина в Escherichia coli.MSystems 4.
13. Turner, P.C. et al. (2011) . YqhC регулирует транскрипцию соседних генов Escherichia coli yqhD и dkgA, которые участвуют в толерантности к фурфуралу. J. Ind. Microbiol. Биотехнолог. 38, 431–439.
14. Лав М.И., Хубер В. и Андерс С. (2014). Модерированная оценка изменения кратности и дисперсии для данных секвенирования РНК с помощью DESeq2. Геном биол. 15, 550.
15. Стивенс, М. (2017). Показатели ложных открытий: новая сделка. Биостат. Оксф. англ. 18, 275–294.
16.Ричи, М.Е., Фипсон, Б., Ву, Д., Ху, Ю., Лоу, К.В., Ши, В., и Смит, Г.К. (2015). limma обеспечивает анализ дифференциальной экспрессии для секвенирования РНК и исследований микрочипов.
Нуклеиновые Кислоты Res. 43, е47.
17. Макиннес, Л., Хили, Дж. и Мелвилл, Дж. UMAP: Равномерная аппроксимация многообразия и проекция для уменьшения размерности. arXiv: 1802.03426 [cs, статистика] (2018).
18. Рахман М.Ф. и соавт. HDBSCAN: кластеризация на основе плотности по службам на основе местоположения. arXiv: 1602.03730 [CS] (2016).
Персистентная репликация модифицированного химерного аденовируса ONYX-015 как в опухолевых, так и в стромальных клетках пациента с имплантатами карциномы желчного пузыря
Реферат
Назначение: ONYX-015 представляет собой химерный аденовирус с делецией E1B, предназначенный для преимущественной репликации в р53-дефицитных опухолевых клетках; однако мало что известно о его фактическом потенциале репликации в опухолях человека. Мы предположили, что репликация позднего вирусного гена, гексона , будет демонстрировать репликацию вируса в тканях человека.
Экспериментальный план: В ходе клинического исследования пациенту с парными имплантатами брюшной стенки от первичной карциномы желчного пузыря вводили ONYX-015, 1 × 10 10 вирусных частиц/очаг с последующим последовательным иссечением поражения через 37 часов и 7 дней.
Срезы тканей анализировали на наличие признаков репликации вируса.
Результаты: ПЦР с обратной транскрипцией in situ использовали для измерения экспрессии гексона .Сильные сигналы были получены в железообразующих опухолевых клетках как через 37 часов, так и через 7 дней. Сигнал преимущественно наблюдался в цитоплазме. Сигнал также наблюдался в соседних нормальных стромальных клетках. Анализ статуса p53 опухоли с помощью иммуногистохимии и Affymetrix Genechip продемонстрировал инактивирующую мутацию в p53. Рутинное окрашивание срезов опухоли H&E не выявило признаков некроза через 37 часов или 7 дней после инъекции вируса. Наличие вирусного белка как через 37 часов, так и через 7 дней было подтверждено иммуногистохимическим методом с использованием антител, направленных против белков гексона, пентона и волокон.
Выводы: Доказательства репликации гексона подтверждают, что ONYX-015 не только присутствует, но и способен к репликации в опухолевых клетках в течение 1 недели после внутриочаговой инъекции, и что репликация не ограничивается опухолевыми клетками с мутацией p53.
ВВЕДЕНИЕ
ONYX-015 (CI-1042, dl1520) представляет собой химерный аденовирус типа 2 и 5, который был генетически модифицирован путем делеции части E1B вирусного генома (1) .Вирус использовался в терапевтических целях в качестве противоракового агента с целью ограничения репликации неоплазии с мутацией p53, сохраняя человеческие ткани p53 дикого типа (обзор в ссылке 2). ). Поскольку практически в половине всех злокачественных неоплазий пути p53 нарушены (3). , эта стратегия представляется осуществимой.
Доклинические исследования подтвердили ожидаемую противораковую активность вируса ONYX-015 (4)
. Исследование фазы I продемонстрировало переносимость этого препарата у пациентов (5).
, а исследование фазы II продемонстрировало клиническую активность у пациентов с раком головы и шеи, получающих монотерапию ONYX-015 (6).
.В последующем исследовании у пациентов с раком головы и шеи, получавших обычную химиотерапию с внутриочаговыми инъекциями ONYX-015 или без них, более выраженный клинический эффект наблюдался у пациентов, получавших комбинированную терапию (7).
. В настоящее время продолжается многоцентровое подтверждающее исследование у пациентов с плоскоклеточным раком головы и шеи.
Фармакокинетика и механизм действия вируса ONYX-015 остаются плохо изученными. В последнее время возникли разногласия относительно того, свидетельствует ли длительная детектируемая циркуляция генома ONYX-015 о наличии репликации вируса (8). .Поэтому было бы полезно иметь более четкое представление о репликации вируса ONYX-015 в опухолевых тканях, чтобы оптимизировать его использование в клинике, особенно в сочетании с другими терапевтическими методами.
В недавнем клиническом исследовании по изучению клинической активности ONYX-015, вводимого внутри очага у пациентов с рефрактерными опухолями верхних отделов желудочно-кишечного тракта (9)
, мы смогли изучить присутствие вируса в двух соседних имплантатах брюшной стенки из первичной карциномы желчного пузыря через 37 часов и 7 дней после внутриочаговой инъекции.Образцы были получены для IHC 3 анализа присутствия вируса; однако это не предоставило доказательств того, реплицировался ли вирус.
Геном аденовируса представляет собой линейную двухцепочечную молекулу размером от 34 до 36 т.п.н. для большинства серотипов с инвертированными концевыми повторами, содержащими точки начала репликации ДНК (10).
. С обеих цепей транскрибируется восемь единиц транскрипции, и каждая единица транскрипции продуцирует несколько транскриптов посредством альтернативного сплайсинга и множественных сайтов полиаденилирования.Аденовирусный геном сложно транскрибируется во времени с помощью РНК-полимеразы II; Продукты вирусных генов делятся на три группы в зависимости от последовательности, в которой они транскрибируются. Немедленные ранние гены, E1A , трансактивируют другие ранние гены, E1B , E2 , E3 и E4 , которые в основном связаны с регуляцией экспрессии вирусных генов, репликацией ДНК и регуляцией хозяина. иммунный ответ на вирусную инфекцию. Напротив, поздние гены, с L1 по L5 , транскрибируются с основного позднего промотора и в основном кодируют белки, составляющие вирусную частицу, которые включают белки гексонов, основной белок оболочки вириона, на долю которого приходится 240 капсомеров из 252 субъединиц, которые составляют капсид.
Поэтому мы пришли к выводу, что если бы были доказательства поздней транскрипции вирусного гена в инъецированных опухолевых тканях, которые мы впоследствии резецировали, это было бы предполагаемым свидетельством успешной репликации ONYX-015.
Используя in situ RT-PCR 3 для измерения экспрессии гена позднего вирусного гексона, мы смогли установить доказательства репликации вируса в обе временные точки. Таким образом, эти исследования демонстрируют на метастатической карциноме желчного пузыря человека, что ONYX-015, введенный внутрь очага поражения, способен инфицировать и реплицироваться в опухолевых клетках человека в клинических условиях, и что эта способность к репликации сохраняется в течение по меньшей мере 7 дней.Однако репликация не ограничивалась только р53-мутантными опухолевыми клетками, но происходила и в нормальных стромальных клетках.
Материалы и методы
Культура клеток.
клетки НТ-29 (Американская коллекция типовых культур, Манассас, Вирджиния) из клеточной линии карциномы толстой кишки человека выращивали в среде RPMI 1640 с добавлением 10% фетальной телячьей сыворотки и 1% пенициллина-стрептомицина, а также клетки L-929 из клеточную линию мышиных фибробластов, которая не поддерживает репликацию аденовируса типа 2, выращивали в минимальной основной среде Игла с 2 мМ l-глутамина и сбалансированным солевым раствором Эрла, доведенным до содержания 1.
5 г/л бикарбоната натрия, 0,1 мМ заменимых аминокислот, 1,0 мМ пирувата натрия, 10% эмбриональной бычьей сыворотки и 1% пенициллин-стрептомицина. Все клетки содержали во влажной атмосфере с 5% CO 2 при 37°C. Все продукты клеточных культур были приобретены у Life Technologies, Inc. (Гранд-Айленд, Нью-Йорк).
Получение тканей.
Ткань была получена от 61-летней пациентки с метастатической карциномой желчного пузыря, включенной в T98–0013, исследование фазы II ONYX-015 при первичных гепатобилиарных карциномах, которое спонсировалось Программой оценки терапии рака Национального института рака. и одобрен Институциональным наблюдательным советом Медицинского центра Монтефиоре и Комитетом по всеобъемлющему рассмотрению протокола онкологического центра Альберта Эйнштейна.О результатах этого испытания будет сообщено отдельно. От пациентки получено информированное согласие на участие в протоколе хирургического удаления опухолей и использование тканей для генетических исследований.
Два смежных имплантата брюшной стенки от первичной карциномы желчного пузыря (рис. 1)⇓
были инъецированы ONYX-015, 1 × 10 10 вирусных частиц с использованием одной прямой инъекции в центр опухоли. Имплантаты удаляли последовательно через 37 часов и через 7 дней под местной анестезией.После иссечения ткань немедленно замораживали, а срезы помещали на предметные стекла, подходящие для in situ RT-PCR (Perkin-Elmer, Boston, MA), и фиксировали в 10% забуференном формалине на 16 часов. Были также получены срезы для обычного окрашивания H&E, для исследований IHC, для белков вирусной оболочки и для статуса p53. Кроме того, был получен образец ткани для генетического исследования р53 с помощью микрочипового анализа Affymetrix Genechip.
Компьютерная томография подкожной клетчатки околопупочный имплантат ( стрелка ) из первичной карциномы желчного пузыря.Второе поражение, не показанное, располагалось рядом и было примерно такого же размера.
Методология in situ RT-PCR была описана ранее (11
, 12)
. Предметные стекла регидратировали в градуированных растворах этанола. Расщепление протеазой проводили путем обработки 0,2% пепсином (Sigma Chemical, Сент-Луис, Миссури) в 0,01 н HCl в течение 45 мин при комнатной температуре с последующим расщеплением ДНКазой ДНКазой, не содержащей РНКазы (Boehringer Mannheim, Индианаполис, Индиана), 0 .1 мМ ацетат натрия, 5 мМ сульфат магния и 15 единиц ДНКазы при 37°С в течение ночи. кДНК первой цепи синтезировали в интактных клетках под покровным стеклом с использованием 60 мкл смеси комнатной температуры (буфер для ПЦР, содержащий 5 мМ MgCl 2 , по 1 мМ dATP, dTTP, dGTP и dCTP, 50 ед. ингибитора РНКазы, 125 ед. единиц обратной транскриптазы вируса мышиного лейкоза Молони (2,5 единицы/мкл) и 5 пмоль/мкл pdN6 в качестве праймера для ОТ-ПЦР при 37°C в течение 1,5 ч.
проводили в 60 мкл ПЦР-смеси, содержащей ПЦР-буфер с 5 мМ MgCl 2 , по 200 мкМ каждого из dATP, dTTP, dGTP и dCTP, 12 единиц полимеразы TaqDNA (Perkin-Elmer) и 1.6 мкм выше и ниже по течению праймеров (таблица 1)⇓ . Все праймеры были разработаны в нашей лаборатории и синтезированы Sigma Genosys Facility (Woodlands, TX). ОТ-ПЦР проводили на In Situ RT-PCR System 1000 (Perkin-Elmer) с начальной денатурацией при 94°С в течение 2 мин, затем 30 циклами при 94°С в течение 1 мин и отжигом при 60°С в течение 2 мин. , и удлинение при 72°С в течение 2 мин.
На месте Гибридизация. продукта ПЦР были обнаружены, как описано ранее (11
, 12)
путем гибридизации с зондом E1B, специфичным для области, меченным дигоксигенином, 5′-TTGAGTCACACTAAGATATT GCT-3′, зондом гексона, специфичным для области, меченным дигоксигенином, 5′-CACGGTGGCACCTA CGCACGACG-3′, и зондом GAPDH, специфичным для области, меченным дигоксигенином.
дигоксигенин, 5′-CATGTTCGTCATGGGTGTGAA-3′ (Genosys, Woodlands, TX) соответственно.Гибридизацию проводили при 42°C в течение ночи в гибридизационном буфере [10% деионизированный формамид (Sigma Chemical), 10% (масса/объем) декстрансульфата (Sigma Chemical), 2× SSC, 5 пмоль/100 мкл зонда]. После гибридизации предметные стекла промывали 1× SSC и 0,2% BSA в течение 10 мин при 54°C, затем промывали в буфере А [0,1 м Трис-HCl (pH 7,5), 0,15 м NaCl] и затем инкубировали при комнатной температуре в течение 30 минут в разбавленных 1:50 антидигоксигенин-AP Fab-фрагментах (Boehringer Mannheim) в буфере А. После промывки в буфере В [0.1 м Трис-HCl (pH 9,5), 0,15 м NaCl, 50 мМ MgCl 2 ] при комнатной температуре в течение 5 мин, предметные стекла инкубировали в нитросинем тетразолии/5-бром-4-хлор-3-индолилфосфате (Boehringer Mannheim) в соотношении 1:400:1 нитросиний тетразолий:буфер:5-бром-4-хлор-3-индолилфосфат.
Внутренний контроль на каждом предметном стекле включал срез ткани, обработанный обратной транскриптазой, но не ДНКазой (положительный контроль), и срез ткани, обработанный ДНКазой, но не обратной транскриптазой (отрицательный контроль).Внешние контроли, используемые в каждом эксперименте, использовали анализ in situ RT-PCR для экспрессии гена домашнего хозяйства, GAPDH , который также включал свои собственные внутренние положительные и отрицательные контроли.
IHC и антитела.
ИГХвыполняли на фиксированных формалином и залитых парафином срезах тканей. Антитела к ИГХ, антифибро, антигексон и антипентон были описаны ранее (13 , 14) . Окрашивание IHC выполняли с использованием автоматического иммунокрасителя TechMate 500 (Ventana Medical Systems, Tucson, AZ) в соответствии с модифицированным протоколом воспалительных белков макрофагов от производителя.Вкратце, парафиновые срезы ткани (толщиной 4 мкм) депарафинизировали в ряде ксилолов и регидратировали в спиртах с убывающей концентрацией. Перед окрашиванием препараты предварительно обрабатывали 0,1% раствором трипсина (рН 7,8) при 37°С в течение 10 мин. Все три поликлональных кроличьих антитела (гексон, пентон и волокно), индуцированные против отдельных вирусных белков, выделенных из клеток HeLa, инфицированных Ad2, использовали в разведении 1:1000 с использованием системы вторичного обнаружения пероксидазы ChemMate ABC (Ventana Medical Systems). Пероксидазную реакцию развивали с использованием жидкого 3,3′-диаминобензидинового субстрата хромогена, входящего в комплект.В качестве положительного контроля использовали парафиновые срезы фиксированного формалином клеточного блока, изготовленного из культивируемых клеток НТ-29, инфицированных тем же аденовирусом. Срезы окрашивали мышиными антиаденовирусными моноклональными антителами (смесь клонов 20/11 и 2/6), индуцированными против адено 3 (MAB805; Chemicon International, Темекула, Калифорния), со специфичностью в отношении 41 аденовирусного серотипа, протестированного в разведении 1:1000 ( данные не показаны). Отрицательные контроли с неиммунным кроличьим IgG или мышиным IgG проводили параллельно.
ИГХ-окрашиваниеантителом p53 (разведение 1:50; DAKO) проводили на универсальной системе окрашивания DAKO Autostainer и проявляли с использованием набора DAKO EnVision + , мышиной пероксидазы с хромогеном DAKO 3,3′-диаминобензидин + .
Анализ р53 с помощью микрочипа.
НаборыQiagen DNA Mini (Qiagen, Inc., Валенсия, Калифорния) использовали для выделения геномной ДНК из образцов опухоли. Геномную ДНК амплифицировали с использованием набора праймеров GeneChip p53 (Affymetrix, Santa Clara, CA) и ДНК-полимеразы Amplitaq Gold (Applied Biosystems, Foster City, CA) в соответствии с инструкциями Affymetrix для подготовки мишени p53. Кодирующие области гена р53 человека амплифицировали в виде 10 отдельных ампликонов в одной мультиплексной реакции.Затем ампликоны ДНК фрагментировали с использованием реагента фрагментации GeneChip (Affymetrix) в соответствии с инструкциями производителя. Фрагментированные ДНК-ампликоны были помечены на их 3′-концах флуоресцеинированным дидезоксинуклеотидом (флуоресцеин-ddCTP) и набором для маркировки терминалов BioArray для анализов ДНК-зондов (Enzo Diagnostics, Farmingdale, NY) в соответствии с инструкциями производителя. Затем меченые фрагменты помещали в гибридизационный буфер (6× солевой раствор-фосфат натрия-ЭДТА, 0,05% Triton X-100 (Sigma Chemical), 2 мг/мл ацетилированного БСА (Life Technologies, Inc.), и 2 нМ контрольный олигонуклеотид F1 (Affymetrix). Матрицы зондов GeneChip p53 (Affymetrix) гибридизовали с мечеными фрагментами и промывали на станции GeneChip Fluidics Station 400 в соответствии с инструкциями производителя. Массивы зондов сканировали (GeneArray Scanner 2508; Affymetrix) и анализировали с использованием программного обеспечения Microarray Suite версии 5.0 (Affymetrix).
РЕЗУЛЬТАТЫ
Специфичность метода
in Situ RT-PCR.Как показано на рис. 2 A ⇓ , ОТ-ПЦР-анализ экстрактов инфицированных клеток ONYX-015 с использованием праймеров для гексона и GAPDH привел к получению уникальных транскриптов с ожидаемой молекулярной массой. Как показано на рис. 2 B ⇓ , меченные дигоксигенином зонды для гексонов и транскриптов GAPDH идентифицировали уникальные транскрипты с ожидаемой молекулярной массой.
Рис. 2.ОТ-ПЦР и Саузерн-анализ праймеров/зондов. A , в клетках рака толстой кишки человека HT-29, инфицированных ONYX-015, праймеры для гексона и GAPDH генерировали уникальные транскрипты ожидаемого размера. B , Саузерн-анализ блотов, полученных из продуктов ПЦР с использованием меченого дигоксигенином флуоресцентного зонда для мРНК гексона или GAPDH, дал уникальные полосы ожидаемого размера.
Клетки карциномы толстой кишки человека HT-29 были инфицированы ONYX-015 in vitro при множественности заражения 1, что приводит к инфицированию почти всех клеток. Как показано на рис. 3⇓ , in situ ОТ-ПЦР продемонстрировала сильное положительное окрашивание в клетках положительного контроля (обработанных обратной транскриптазой), положительное окрашивание в клетках, обработанных как ДНКазой, так и обратной транскриптазой, и по существу отсутствие окрашивания в отрицательных контролях (обработанных ДНКазой, но не обратной транскриптазой). ).В клетках, обработанных ДНКазой и обратной транскриптазой, окрашивание ограничивалось, как и ожидалось, цитоплазмой, тогда как в положительном контроле как цитоплазма, так и ядро были сильно положительными, как и ожидалось.
Рис. 3.In situ Исследования ОТ-ПЦР клеток HT-29, инфицированных ONYX-015. Клетки анализировали на экспрессию GAPDH ( а , с , е ) или гексона ( b , d , f ) через 48 часов после инфицирования.Положительные контроли ( a и b ) демонстрируют сильное ядерное и цитоплазматическое окрашивание. В клетках, обработанных ДНКазой для элиминации геномной ДНК, мРНК как GAPDH ( c ), так и гексона ( d ) обнаруживаются преимущественно в цитоплазме. Отрицательные контроли для обоих (обработанных ДНКазой и без обратной транскриптазы) демонстрируют отсутствие сигнала ( e и f ).
Чтобы подтвердить специфичность метода, in situ RT-PCR исследования были проведены на мышиных клетках L929, которые допускают проникновение аденовируса и, следовательно, содержат вирусную ДНК, но которые не подтверждают транскрипцию поздних вирусных генов (15) .Как показано на рис. 4 a ⇓ , в положительных контролях, обработанных обратной транскриптазой, были обнаружены высокие уровни транскриптов вирусного гексона , тогда как в клетках, обработанных ДНКазой с (рис. 4 b ) признаков транскрипции обнаружено не было или без (отрицательный контроль, рис. 4 c ⇓ ) обратная транскриптаза, что указывает на то, что все транскрипты в положительном контроле происходили из ДНК гексона , а не мРНК гексона . На рис. 4 и ⇓ , окрашивание было ограничено ядром, что является дополнительным подтверждением того, что транскрибируется ДНК, а не мРНК.
Рис. 4.In situ ОТ-ПЦР исследования мышиных L-клеток, инфицированных ONYX-015. L-клетки мыши допускают проникновение вируса и репликацию ранних вирусных генов, но не поздних генов. L-клетки мышей, инфицированные вирусом в течение 48 часов, демонстрируют сильное окрашивание ядер на гексон в отсутствие ДНКазы и в присутствии обратной транскриптазы ( a ), но не в присутствии ДНКазы ни с ( b ), ни без ( c ). ) обработка обратной транскриптазой, указывающая на наличие вирусной ДНК ( a ), но отсутствие вирусной мРНК ( b ).
Отсутствие некроза в метастатических поражениях после репликации вируса.
Окрашенный H&E срез имплантата брюшной стенки желчного пузыря, резецированный через 7 дней после внутриопухолевой инъекции ONYX-015, показан на рис. 5⇓ . На репрезентативном срезе видны скудные опухолевые клетки, некоторые из которых имеют железистую структуру, окруженные плотной стромальной тканью (рис. 5 A )⇓ . Нет признаков некроза опухоли или апоптоза ни через 37 ч (данные не показаны), ни через 7 дней после внутриочаговой инъекции вируса (рис.5 Б )⇓ . Имеются также скудные доказательства воспалительной реакции вокруг опухолевых клеток.
Рис. 5.Окрашенный H&E срез имплантата брюшной стенки первичной карциномы желчного пузыря. Срезы опухоли, показанные как ×600 ( A ) и ×100 (×), вырезали через 37 ч (данные не показаны) и через 7 дней после инъекции ONYX-015, 1 × 10 10 частиц. Крупные железообразующие опухолевые клетки ( белые стрелки ) окружены обильной скиррозной реакцией ( черные стрелки ).Нет никаких признаков некроза опухоли или апоптоза и только скудные доказательства воспалительной реакции вокруг опухолевых клеток в любой момент времени.
р53 Анализ.
Статус генома p53 был оценен с помощью IHC и анализа Genechip (16) . Оба узелка продемонстрировали сверхэкспрессию р53 с помощью ИГХ (58 и 84% положительных результатов; данные не показаны), что указывает на наличие мутации в геноме. Исследования Affymetrix продемонстрировали мутацию g→c (из аргинина в пролин) в кодоне 273, которая является инактивирующей мутацией.
Наличие репликации вируса в имплантатах карциномы желчного пузыря через 37 часов и 7 дней.
Экспрессия GAPDH , используемая в качестве внешнего контроля для всех экспериментов, была идентифицирована с помощью in situ RT-PCR во всех исследованных срезах опухоли (рис. 6 b )⇓ . ONYX-015 присутствовал как в стромальных, так и в опухолевых клетках как через 37 часов, так и через 7 дней после внутриопухолевой инъекции, что подтверждается сильным окрашиванием в положительном контроле (обработанном обратной транскриптазой, но не ДНКазой, рис.7 и ⇓ ) и по более слабому, но явно положительному окрашиванию, показанному на рис. 8 a ⇓ . Имеются четкие доказательства экспрессии мРНК гексона в срезах, обработанных ДНКазой и обратной транскриптазой через 37 ч (рис. 7 b )⇓ и 7 дней (рис. 8 б )⇓ . При большем увеличении рис. 9⇓ , репликацию мРНК гексона можно наблюдать в цитоплазме опухолевых клеток, образующих железистый рисунок, а также в нормальных стромальных тканях, которые представлены обильными веретенообразными клетками, примыкающими к опухолевым клеткам.Менее интенсивное окрашивание наблюдается на 7 сутки (рис. 8 б ⇓ и 9 б ⇓ ) по сравнению с 37 ч (рис. 8 a ⇓ и 9 а ⇓ ) согласуется с более низкой вирусной нагрузкой на данный момент.
Рис. 6.In situ RT-PCR анализ экспрессии GAPDH в имплантате брюшной стенки через 37 часов после инъекции ONYX-015 (×400). a , репрезентативный срез, обработанный обратной транскриптазой, но не ДНКазой (положительный контроль), демонстрирует положительное окрашивание как ДНК, так и мРНК.b наблюдается окрашивание мРНК GAPDH в срезах, обработанных обратной транскриптазой и ДНКазой, что явно отличается от c , в которых срезы обрабатывали только ДНКазой (отрицательный контроль). Тонкое, синее, зернистое цитоплазматическое окрашивание наблюдается как в более крупных опухолевых клетках ( белые стрелки ), так и в соседних стромальных клетках ( черные стрелки ). Идентичные данные наблюдались в тканях, иссеченных на 7-й день (данные не показаны ).
Рис. 7.In situ ОТ-ПЦР анализ экспрессии вирусного гексона в имплантате брюшной стенки из первичной карциномы желчного пузыря через 37 ч после инъекции ONYX-015 (×400). a , положительные контроли (обработанные обратной транскриптазой, без ДНКазы) демонстрируют сильное окрашивание, указывающее на обратную транскрипцию мРНК гексона и/или ДНК гексона как в опухолевых клетках ( белые стрелки ), так и в стромальных клетках ( черные стрелки ). b , в срезах, обработанных как ДНКазой, так и обратной транскриптазой, наблюдается цитоплазматическое окрашивание, характеризующееся мелкими голубыми гранулами как в более крупных опухолевых клетках ( белые стрелки ), так и в соседних стромальных клетках ( черные стрелки ), что указывает на обратную транскрипцию мРНК гексона. c , отрицательные контроли (только ДНКаза) демонстрируют почти полное отсутствие сигнала, что указывает на эффективность обработки ДНКазой.
Рис. 8.In situ RT-PCR анализ экспрессии вирусного гексона в имплантате брюшной стенки из первичной карциномы желчного пузыря через 7 дней после инъекции ONYX-015 (×400). В эксперименте, в котором опухолевая ткань была обработана идентично a , b и c на рис. 7⇓ , за исключением того, что анализ был выполнен на 7 сутки, мРНК гексона все еще обнаруживается в опухолевых клетках ( b , белые стрелки ) и стромальных клетках ( b , черные стрелки ).Сигнал мРНК гексона значительно снижен по сравнению с тем, что присутствует через 37 часов, но намного выше отрицательного контроля в c . a , положительные контроли, обработанные обратной транскриптазой, но не ДНКазой; b , срезы, обработанные обратной транскриптазой и ДНКазой; c , отрицательный контроль, обработанный только ДНКазой.
Рис. 9.In situ RT-PCR анализ экспрессии вирусных гексонов в имплантатах брюшной стенки через 37 часов ( a ) и 7 дней ( b ) после обработки ONYX-015 (×600).Увеличение большего увеличения секций, показанных на рис. 7 б ⇓ и 8 б ⇓ демонстрирует мРНК гексона в виде мелких синих гранул в цитоплазме опухолевых клеток по краю слизистой оболочки псевдожелезы, образованной опухолевыми клетками ( белые стрелки ), а также в цитоплазме соседних стромальных клеток. Менее интенсивное окрашивание b , большая мощность рис. 8⇓ b по сравнению с a согласуется с более низкой вирусной нагрузкой в этой опухоли через 7 дней.
Как и ожидалось, отрицательный контроль (обработанный ДНКазой и без обратной транскриптазы, рис. 7 c ⇓ и 8 с ⇓ ) не продемонстрировал признаков сигнала. Это подтвердило эффективность лечения ДНКазой. Кроме того, в срезах ткани нерелевантной, не зараженной вирусом опухоли с помощью этого анализа не было обнаружено никакого сигнала (данные не показаны).
Обнаружение вирусного белка в имплантатах карциномы желчного пузыря с помощью IHC через 37 ч и 7 дней после инъекции ONYX-015.
Срезы тканей анализировали с помощью ИГХ с использованием антител против вирусных белков гексона, пентона и волокон. Как показано на рис. 10⇓ , ИГХ-анализ с использованием антигексоновых антител срезов тканей как через 37 ч, так и через 7 сут после введения ONYX-015 демонстрирует присутствие вируса как в более крупных опухолевых клетках, формирующих железистый паттерн, так и в нормальных стромальных тканях, которые представлены обильные веретенообразные клетки, примыкающие к опухолевым клеткам. Исследования IHC с использованием антител к белкам пентона и волокон подтвердили это открытие, хотя были отмечены гораздо более низкие уровни положительности (данные не показаны).
Рис. 10.ИГХ-анализ белка гексона через 37 ч и 7 дней (×400). Белок гексона экспрессируется как в больших железообразующих опухолевых клетках (, белые стрелки, ), так и в соседних веретенообразных стромальных клетках (, черные стрелки, ) в обе временные точки.
ОБСУЖДЕНИЕ
Доклинические исследования активности ONYX-015 продемонстрировали эффективное инфицирование и репликацию вируса в опухолевых эксплантатах человека. У бестимусных мышей nu/nu с двусторонним s.в. Имплантаты карциномы шейки матки C33A, в/в. инъекция ONYX-015, 10 9 БОЕ путем внутриопухолевой инъекции привела к присутствию вируса в контралатеральной, а также в инъецированной опухоли, по оценке окрашивания IHC (17) . Примечательно, что после введения в хвостовую вену ONYX-015, 10 9 БОЕ, высокие титры вируса первоначально обнаруживались в печени, основном месте депонирования вируса после внутривенного введения. инъекция снижалась в 1000 раз до неопределяемого уровня через 72 часа, тогда как титры вируса в опухолях увеличивались в 150 раз между 3 и 72 часами после инъекции.Наконец, 10 ежедневных инъекций ONYX-015, 10 8 pfu мышам nu/nu, несущим опухолевые ксенотрансплантаты HCT116, приводили к некоторой полной регрессии опухоли с обширной цитопатологией, связанной с репликацией вируса, и некрозом, а также наличием вируса в результате гибридизации in situ . .
Клиническая ситуация несколько иная. В контролируемом исследовании фазы II фторурацила, цисплатина и ONYX-015 у пациентов с плоскоклеточным раком головы и шеи метастатические очаги, инъецированные вирусом, продемонстрировали некроз и ассоциированные с аденовирусом цитопатические изменения, что определялось гибридизацией in situ , считались показателем репликации аденовируса (7) .В другом недавнем исследовании фазы II внутриочаговой инъекции ONYX-015, 2 × 10 11 частиц в течение 5 дней подряд или два раза в день в течение 2 недель подряд, циркулирующий геном ONYX-015 был обнаружен у 41% пациентов на 5 и 6 дни. цикла 1, у 9% пациентов на 11-й день цикла 1 и ни у одного пациента на 22-й день с использованием анализа TaqMan, предназначенного для амплификации ампликона из 92 нуклеотидов, специфичного для ДНК ONYX-015 (18). . Авторы пришли к выводу, что это «наводит на мысль о внутриопухолевой репликации.В отличие от исследований на животных, в которых наблюдались обширные цитопатические эффекты и некроз после внутривенного введения. инъекции, в этом исследовании наблюдалась лишь умеренная противоопухолевая эффективность.
Предположение о том, что присутствие вирусного генома, обнаруженное с помощью анализа TaqMan, является доказательством репликации вируса, было оспорено (8) . В частности, среди 190 субъектов, получавших лечение некомпетентным к репликации аденовирусом RPR/INGN 201, связанные с вектором последовательности были обнаружены в моче в течение 28 дней после последней инъекции вируса.Это показывает, что обнаружение вирусного генома, даже постоянное, не эквивалентно демонстрации репликации вируса в биологических образцах.
Для решения этой проблемы мы использовали методологию in situ RT-PCR, модифицированную по сравнению с методом, разработанным в нашей лаборатории (11 , 12) , на образцах тканей из метастатических поражений, которым вводили ONYX-015, 1 × 10 10 БОЕ, через 37 часов и 7 дней. Этот метод имеет два преимущества по сравнению с альтернативными анализами, такими как ПЦР в реальном времени.Во-первых, он способен обнаруживать присутствие вируса в определенных клетках, таким образом, отличая изменения в экспрессии генов в опухолевых клетках от экспрессии генов в соседних нормальных клетках, в отличие от обнаружения вирусного генома в биологических жидкостях или в гомогенизированных образцах опухоли или биопсии. Во-вторых, он способен обнаруживать, а в некоторых случаях и количественно определять экспрессию генов, в отличие от обнаружения присутствия вирусного геномного материала.
Использовались строгие контроли, в том числе положительные и отрицательные контроли для гексона и внешнего стандарта GAPDH.Кроме того, исчерпывающие исследований in vitro подтвердили правильность этой методологии. Эксперименты с L-клетками на мышах особенно важны в этом отношении, так как четко отличают репликацию вируса от присутствия нереплицирующейся вирусной ДНК (19). .
Наша гипотеза заключалась в том, что экспрессия гена гексона , репрезентативного позднего гена (10) , продемонстрирует, что вирус реплицируется в опухолевой ткани, а не просто присутствует в нерепликативном состоянии. Одно предостережение заключается в том, что хотя экспрессия позднего вирусного гена является предполагаемым свидетельством репликации вируса, тем не менее, мы не продемонстрировали, что вирусный белок собирается в вирион в этих клетках, что потребовало бы исследований с помощью просвечивающей электронной микроскопии.Кроме того, отсутствие клеточного некроза или цитопатологических изменений, наблюдаемых в моделях эксплантированной опухоли, описанных выше, позволяет предположить, что репликация вируса может происходить на относительно низком уровне. Тем не менее, представленные данные кажутся убедительными в отношении того, что репликация вируса происходит устойчивым образом.
Распространение вируса в опухолевых клетках не является неожиданным, если исходить из гипотезы о том, что ONYX-015 будет реплицироваться в клетках с мутацией p53 (20). . Данные, подтверждающие наличие мутации p53 в этих опухолях, достаточно убедительны.IHC был сильно положительным, что указывало на наличие мутации в геноме, которая стабилизирует белок и увеличивает обычно короткий период полураспада. Кроме того, наблюдалась мутация аргинина на пролин в кодоне 273. Это одна из аминокислот, которая непосредственно взаимодействует с ДНК в месте взаимодействия белок-ДНК p53; следовательно, вполне вероятно, что эта мутация препятствует регуляторной функции р53.
Представляет значительный интерес тот факт, что репликация вируса наблюдалась не только в опухолевых клетках, но и в соседних нормальных стромальных клетках, предположительно p53 дикого типа, в наших образцах опухолей.Необходимость того, чтобы пути p53 были нефункциональными для того, чтобы происходила репликация ONYX-015, является еще одним продолжающимся спором. Несмотря на первоначальный дизайн вируса как избирательно способного к репликации только в р53-дефицитных клетках, по-видимому, имеются очень убедительные доказательства того, что вирус ONYX-015 способен реплицироваться в р53 клетках дикого типа (4). , 21 , 22) . Репликация может происходить не так эффективно в интактных клетках p53 как in vitro (23) и в клинических условиях (18) . Кроме того, аберрации в пути р53, включая изменения в других компонентах пути р53, таких как р14 ARF или MDM2, могут быть функциональными заменителями мутации р53 в клетках с интактным р53 (24). , 25) .Возможно, инактивирующая мутация в p53 обеспечивает более быструю репликацию вируса, но не требуется для репликации вируса, даже при отсутствии других мутаций или изменений пути p53-Rb. Присутствие мРНК вирусного гексона в веретенообразных стромальных клетках, прилегающих к опухолевым клеткам, может указывать на то, что ONYX-015 может реплицироваться в нормальных клетках p53 дикого типа. Необходимы дополнительные исследования, чтобы продемонстрировать, что эти веретенообразные клетки на самом деле не являются вариантами опухолевых клеток и что у них нет инактивированных путей p53.
Отсутствие некроза или цитопатических изменений в метастатических опухолях, использованных в этом исследовании, несмотря на доказательства вирусной пролиферации, представляет интерес и контрастирует с исследованиями рака головы и шеи, упомянутыми выше (7). , 18) . Даже в определенных клетках, где было показано, что происходит репликация вируса, не было никаких признаков некроза ни в этих клетках, ни в соседних клетках. Одна из возможностей заключается в том, что уровень репликации вируса был слишком низким, чтобы вызвать клеточный некроз.Это согласуется с дозами ONYX-015, использованными в нашем исследовании, которые были примерно в 100 раз ниже, чем те, которые использовались в исследовании головы и шеи (18). . Альтернативная гипотеза состоит в том, что ONYX-015 действует по другому механизму, который не вызывает гибель клеток путем репликации вируса и лизиса клеток, т.е. , путем индукции апоптоза или иммунной стимуляции к раковым или вирусным антигенам на поверхности опухолевых клеток. Недавнее исследование предполагает, что часть E1A аденовирусного генома обладает регулирующими свойствами клеточного цикла и, в частности, подавляет экспрессию циклина D1 (26). .Исследования на установке in vitro подтверждают такую гипотезу. 4 Таким образом, репликация ONYX-015 на уровне опухоли может привести к множественным эффектам, зависящим от типа клеток, включая некроз клеток в одних тканях и цитостаз в других тканях. Эту гипотезу еще предстоит подтвердить.
Таким образом, это первая демонстрация репликации ONYX-015 в образцах опухолей человека как через 37 часов, так и через 7 дней после инъекции с использованием строгих критериев, а не предполагаемых доказательств.Отсутствие некроза опухоли в срезах, которые четко демонстрируют репликацию вируса, позволяет предположить, что в этих опухолях репликация может происходить на низком уровне. Это отличается от предыдущих доклинических исследований с использованием опухолей человека, эксплантированных мышам nu/nu, а также от предыдущих исследований у пациентов с плоскоклеточным раком головы и шеи. Кроме того, наши данные свидетельствуют о том, что может существовать несколько механизмов, с помощью которых лечение ONYX-015 приводит к противораковому эффекту.
Сноски
Затраты на публикацию этой статьи были частично покрыты оплатой страниц.Таким образом, эта статья должна иметь пометку реклама в соответствии с 18 U.S.C. Раздел 1734 исключительно для указания на этот факт.
↵1 Частично поддерживается Национальным институтом рака, грантом NIH N01-CM-07003-74, RO1 AI42295 и грантом поддержки онкологического центра CA 13330, а также грантом Фонда химиотерапии.
↵2 Кому следует направлять запросы на перепечатку, в Отделение гематологии/онкологии, C606, Медицинский колледж Вейла Корнельского университета, 1300 York Avenue, New York, NY 10021.Электронная почта: scw2004{at}med.cornell.edu
3 Используемые сокращения: ОТ-ПЦР, ПЦР с обратной транскрипцией; GAPDH, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа; ИГХ, иммуногистохимия.
4 М. Переулок, личное сообщение.
- Получено 13 мая 2002 г.
- Пересмотр получено 24 июля 2002 г.
- Принято 29 июля 2002 г.
Баркер Д.D., Berk A.J. Белки аденовируса из обеих рамок считывания E1B необходимы для трансформации клеток грызунов вирусной инфекцией и трансфекцией ДНК. Вирусология, 156 : 107-121, 1987.
- ↵
McCormick F. Взаимодействие между белками аденовируса и путем p53: разработка ONYX-015. Семин. Cancer Biol., 10 : 453-459, 2000.
- ↵
Хольштейн М., Rice K., Greenblatt MS, Soussi T., Fuchs R., Sorlie T., Hovig E., Smith-Sorensen B., Montesano R., Harris CC База данных p53 соматических мутаций генов в опухолях и клеточных линиях человека . Nucleic Acids Res., 22 : 3551-3555, 1994.
- ↵
Heise C., Sampson-Johannes A., Williams A., McCormick F., Von Hoff DD, Kirn DH ONYX-015, аденовирус с аттенуированным геном E1B, вызывает опухолеспецифический цитолиз и противоопухолевую эффективность, которая может быть усилена стандартные химиотерапевтические средства.Nat Med., 3 : 639-645, 1997.
- ↵
Ganly I., Eckhardt SG, Rodriguez GI, Soutar DS, Otto R., Robertson AG, Park O., Gulley ML, Heise C., Von Hoff DD, Kaye SB Фаза I исследования Onyx-015, E1B аттенуированный аденовирус, вводимый внутриопухолево больным с рецидивирующим раком головы и шеи. Clin Cancer Res., 6 : 798-806, 2000.
- ↵
Немунайтис Ю., Хури Ф., Ганли И., Арсено Дж., Познер М., Воукс Э., Кун Дж., Маккарти Т., Ландерс С., Блэкберн А., Ромель Л., Рандлев Б., Кэй С., Кирн D. Испытание фазы II внутриопухолевого введения ONYX-015, селективного к репликации аденовируса, у пациентов с рефрактерным раком головы и шеи. Дж. Клин. Oncol., 19 : 289-298, 2001.
- ↵
Хури Ф. Р., Немунайтис Дж., Ганли И., Арсено Дж., Таннок И. Ф., Ромель Л., Гор М., Айронсайд Дж., MacDougall RH, Heise C., Randlev B., Gillenwater AM, Bruso P., Kaye SB, Hong WK, Kirn DH контролируемое исследование внутриопухолевого ONYX-015, селективно реплицирующегося аденовируса, в комбинации с цисплатином и 5-фторурацилом. у пациентов с рецидивирующим раком головы и шеи. Нац. Мед., 6 : 879-885, 2000.
- ↵
Yver A. Указывает ли обнаружение циркулирующего генома ONYX-015 с помощью полимеразной цепной реакции на репликацию вектора?Дж. Клин. Oncol., 19 : 3155-3157, 2001.
- ↵
Маковер Д., Розенблит А., Эдельман М., Аугенлихт Л., Кауфман Х., Хейнс Х., Цвибель Дж., Вадлер С. Эффективность p53-направленной терапии ONYX-015 при гепатобилиарных опухолях. Молекулярные мишени в терапии рака: AACR, 15–19 ноября, 44, Вашингтон, округ Колумбия, 1999.
- ↵
Horwitz M.S. Аденовирусы и поля их репликации B.Н. Найп, Д. М. Хоули, П. М., ред. . Вирусология, 1679–1721, Raven Press, Нью-Йорк, 1990.
. - ↵
Wadler S., Zhang H., Cammer M., Hu X. P. Количественная оценка экспрессии рибонуклеотидредуктазы в клеточных линиях дикого типа и устойчивых к гидроксимочевине с использованием полимеразной цепной реакции с обратной транскриптазой in situ и компьютеризированной системы анализа изображений. Анальный. Biochem., 267 : 24-29, 1999.
- ↵
Чжан Х., Вадлер С. Микропрепарат культивируемых клеток для ПЦР с обратной транскрипцией in situ . Биотехника, 22 : 618-620, 622, 624, 1997.
- ↵
Baum S.G., Horwitz M.S., Maizel J.V. Изучение механизма усиления аденовирусной инфекции человека в клетках обезьян обезьяньим вирусом 40. J. Virol., 10 : 211-219, 1972.
- ↵
Хорвиц М. С., Шарф М.D. Производство антисыворотки против вирусных антигенов Habel K. Salzman N.P. eds. . Fundamental Techniques in Virology, 253–262, Academic Press, Нью-Йорк, 1969.
- ↵
Брейтуэйт А. В., Мюррей Дж. Д., Беллетт А. Дж. Изменения в контроле синтеза клеточной ДНК при аденовирусной инфекции. J. Virol., 39 : 331-340, 1981.
- ↵
Викман Ф. П., Лу М. Л., Тикьяер Т., Олесен С. Х., Андерсен Л. Д., Кордон-Кардо С., Орнтофт Т. Ф. Оценка производительности микрочипа для секвенирования p53 с использованием 140 ранее секвенированных образцов опухоли мочевого пузыря. клин. Chem., 46 : 1555-1561, 2000.
- ↵
Heise C.C., Williams A.M., Xue S., Propst M., Kirn D.H. Внутривенное введение ONYX-015, избирательно реплицирующегося аденовируса, вызывает противоопухолевую эффективность. Cancer Res., 59 : 2623-2628, 1999.
- ↵
Немунайтис Дж., Ганли И., Хури Ф., Арсено Дж., Кун Дж., Маккарти Т., Ландерс С., Мэйплс П., Ромел Л., Рандлев Б., Рейд Т., Кай С., Кирн Д. Избирательная репликация и онколиз в мутантных опухолях p53 с помощью ONYX-015, аденовируса с делетированным геном E1B-55kD, у пациентов с распространенным раком головы и шеи: исследование фазы II. Cancer Res., 60 : 6359-6366, 2000.
- ↵
Янгхазбенд Х.B., Tyndall C., Bellett A.J. Репликация и взаимодействие ДНК вируса и клеточной ДНК в клетках мыши, инфицированных аденовирусом человека. J. Gen. Virol., 45 : 455-467, 1979.
- ↵
Bischoff JR, Kirn DH, Williams A., Heise C., Horn S., Muna M., Ng L., Nye JA, Sampson-Johannes A., Fattaey A., McCormick F. Мутантный аденовирус, который избирательно реплицируется в р53-дефицитных опухолевых клетках человека. Science (Вашингтон, округ Колумбия), 274 : 373-376, 1996.
- ↵
Rothmann T., Hengstermann A., Whitaker N.J., Scheffner M., zur Hausen H. Репликация ONYX-015, потенциального противоракового аденовируса, не зависит от статуса p53 в опухолевых клетках. J. Virol., 72 : 9470-9478, 1998.
- ↵
Goodrum F.D., Ornelles D.A. Статус p53 не определяет исход литической инфекции мутантного аденовируса E1B массой 55 килодальтон. J. Virol., 72 : 9479-9490, 1998.
- ↵
Rogulski K.R., Freytag S.O., Zhang K., Gilbert J.D., Paielli D.L., Kim J.H., Heise C.C., Kirn D.H. Cancer Res., 60 : 1193-1196, 2000.
- ↵
Рис С. Дж., Брандтс С. Х., Чанг А. С., Бидерер С. Х., Ханн Б. С., Липнер Э. М., Маккормик Ф., Корн В.М. Потеря p14ARF в опухолевых клетках способствует репликации мутантного аденовируса dl1520 (ONYX-015). Nat Med., 6 : 1128-1133, 2000.
- ↵
Yang C.T., You L., Uematsu K., Yeh C.C., McCormick F., Jablons D.M. p14(ARF) модулирует цитолитический эффект ONYX-015 в клетках мезотелиомы с p53 дикого типа. Рак Res., 61 : 5959-5963, 2001.
- ↵
Альбанезе К., D’Amico M., Reutens AT, Fu M., Watanabe G., Lee RJ, Kitsis RN, Henglein B., Avantaggiati M., Somasundaram K., Thimmapaya B., Pestell RG Активация гена циклина D1 с помощью Е1А-ассоциированный белок р300 посредством АР-1 ингибирует клеточный апоптоз. Дж. Биол. Chem., 274 : 34186-34195, 1999.
Редакторы генома начинают выстраиваться в очередь за платформой Inscripta Onyx
НЬЮ-ЙОРК. Клиенты начинают выстраиваться в очередь за платформой Onyx Digital Genome Engineering от Inscripta, запущенной в октябре.
Первый из полностью автоматизированных настольных инструментов, предназначенных для редактирования генома в беспрецедентных масштабах, будет передан Джефу Бёке из Нью-Йоркского университета в первой половине этого года. «Это выглядит очень многообещающе», — сказал Бёке, участвовавший в программе раннего доступа. Система «позволила нам параллельно просматривать тысячи изменений», — сказал он.
Черный ящик, размером примерно с настольный секвенатор, по прейскуранту 347 000 долларов, пожалуй, самый большой шаг Inscripta к своей цели стать «Illumina в области редактирования генома», как любит говорить генеральный директор Кевин Несс.«Наша миссия — дать клиентам возможность использовать биологию на большинстве мировых рынков», включая энергетику, материалы, сельское хозяйство и фармацевтику, — сказал генеральный директор Inscripta Кевин Несс. «Это действительно громкое заявление. Как вы это делаете?»
Onyx — это ответ Inscripta, платформа, включающая в себя инструмент, а также реагенты, программное обеспечение и наборы для анализа библиотеки редактирования генов, которая обещает быть одновременно простой и сложной.
Простая часть — начать с одного генома, выбрать необходимые изменения с помощью программного обеспечения и нажать кнопку, чтобы получить смесь из миллионов клеток с 10 000 различных генотипов.Сложная часть — это то, что происходит внутри коробки, и, по словам главного коммерческого директора Джейсона Гэммака, нужно понять, что делает возможным Onyx.
«Когда мы рассказывали людям о нашей науке до запуска прибора, большинство людей думали, что мы предлагаем услугу», — сказал Гаммак. «И они предположили, что мы предлагаем услугу, потому что они понимают абсолютную сложность и тяжесть этой технологии. Даже когда люди смотрят на нее, они изо всех сил пытаются понять, как [настольная] коробка может управлять наукой.
Во-первых, Inscripta обещает, что Onyx сможет редактировать клетки — дрожжей и Escherichia coli на данный момент, хотя со временем есть планы и на клетки млекопитающих — не только с одиночными нокаутами, но и с несколькими типами редактирования.
«Генная функция не собирается производить свойства клеток, необходимые для всех мировых рынков», — сказал Несс. «Вы должны начать вводить нокауты, вставки, делеции, повышающую и понижающую регуляцию генов и [генные] обмены. И во многих случаях это будет не одно изменение, а комбинация нескольких правок на ячейку.Это не просто нокауты, и это нужно для того, чтобы переместить биологию туда, куда мы хотим: включить биоэкономику». one, конечно, не сразу.
«У нас есть процесс проверки клиентов», который был реализован с учетом биобезопасности, сказал Гаммак. «Наша платформа обладает огромной мощностью, и это требует от нас обеспечения ее ответственного использования. Тем не менее, на наш взгляд, это точка демократизации.Мы просто хотим, чтобы у пользователей был опыт в искусстве и науке, а если нет, мы будем работать с ними, чтобы обучить их». Onyx на таких конференциях, как SynBioBeta в Сан-Франциско (где Inscripta запустила Onyx и была главным спонсором), октябрьском собрании Американского общества генетики человека в Хьюстоне и даже ноябрьском собрании GP Write и Sc2.0 в Нью-Йорке. как Muse Bio, вышла из стелса в феврале 2017 года, но работает над Onyx около четырех лет.В декабре 2017 года компания бесплатно предоставила исследовательскому сообществу свой фермент для редактирования генома MAD7, без каких-либо предварительных лицензионных сборов или лицензионных отчислений за продукты, созданные с использованием этой технологии.
Как сообщил GenomeWeb в июне, платформа использует встроенные штрих-коды, которые позволяют системе отслеживать изменения и ячейки в библиотеке. Ранее в этом году фирма опубликовала данные о внутреннем крупномасштабном эксперименте по разработке пути производства лизина. В презентациях на SynBioBeta исследователи Inscripta показали, как всего за несколько месяцев им удалось воспроизвести улучшения, обнаруженные в полевых условиях за десятилетия, и добиться увеличения урожайности в 14 000 раз по сравнению со штаммом дикого типа.
В декабре компания привлекла 125 миллионов долларов в рамках раунда финансирования Серии D, которые она планирует использовать для коммерциализации Onyx и продолжения разработки платформы.
Onyx — это шаг вперед за пределы 96-луночного планшета, использующий уникальные технологии штрихового кодирования, подобные тем, которые аналогичны комбинаторной индексации в секвенировании следующего поколения и геномике отдельных клеток. Но платформа не останавливается на достигнутом. Несс сказал, что Inscripta не хочет просто навязывать исследователям чрезвычайно сложную библиотеку клеток. «Им нужно будет измерить производительность этих больших библиотек, поэтому мы вложили значительные средства в разработку дополнительных тестов», чтобы помочь с анализом, — сказал он.«Это совершенно новые биохимические решения in vitro и конвейеры информатики, которые работают вместе, считывая штрих-коды, нанесенные на плазмиды для редактирования, которые мы трансформируем в клетки».
Компания Inscripta предвидела необходимость генотипирования «выигрышных» правок, которые проверяют пользователи. Эти экраны могут быть выполнены с помощью нескольких существующих инструментов, включая масс-спектрометрию или микроскопию. Для исследования генома Inscripta предлагает гибридный анализ на основе захвата, а также подход к секвенированию всего генома дробовиком, оба из которых предназначены для секвенирования Illumina.Несс сказал, что анализы теоретически могут быть разработаны для работы с другими платформами, если Inscripta решит пойти в этом направлении.
Но Несс подчеркнул, что одного раунда редактирования недостаточно, чтобы произвести значимые изменения во всех возможных путях и геномах. «Вы должны пройти один раунд, усвоить все извлеченные уроки и применить их в следующем раунде, когда вы продвигаетесь вверх по фитнес-ландшафту», — сказал он.
Здесь масштаб помогает изменить игру. «Когда вы могли сделать только 100 клеток, вы хотели просмотреть их все, потому что пытаетесь найти победителя», — сказал Несс.«Когда мы создаем 10 000 клеток, у нас есть не просто один победитель, у нас есть сотни победителей. Таким образом, вы можете [взять неглубокую выборку] и взять несколько победителей и рекомбинировать их в следующем раунде».
«Это вызов, чтобы генотипировать этих победителей», сказал Несс. «Именно здесь на помощь приходят наши тесты. Мы разработали штрих-коды, чтобы вы могли пройти минимальное секвенирование и увидеть все присутствующие генотипы».
Компания Inscripta также разработала метод контроля качества, чтобы гарантировать успешное редактирование.Гаммак отметил, что на самом деле анализы не проводятся на приборе Onyx.
Программное обеспечение также является важной частью платформы, сказал Несс, и Onyx будет поставляться с тремя инструментами: инженерным порталом Inscripta для разработки экспериментов, Inscripta Resolver для анализа результатов секвенирования и Inscripta Learn для итеративного проектирования. Гаммак сказал, что на данный момент часть программного обеспечения «Обучение» будет включена в будущих выпусках, но не сказал, когда именно.
До сих пор Onyx производила впечатление, хотя некоторые наблюдатели вслух задавались вопросом, какую поддержку фирма получит сразу.
«Я впечатлен машиной, и ее цена не так «преувеличена», — сказал Джае-Гу Пан, технический директор Genofocus, южнокорейской компании, занимающейся синтетической биологией. «Да. Я бы выстроился в очередь за покупкой Оникса», — сказал он, предупредив, что не захочет использовать его с организмом, фактически используемым для производства материалов. По словам Пэна, Onyx требует, чтобы пользователь отправил Inscripta геном всего организма, а на такой риск большинство компаний просто не пожелали бы пойти, если речь идет о запатентованных организмах.Скорее всего, он будет использовать «промежуточный» штамм с Ониксом и перенесет полученные знания в производственный штамм.
«Inscripta считает безопасность, как защиту данных, так и биозащиту, главным приоритетом для бизнеса, и вложила значительные средства в эти области», — сказал Гаммак. «Мы стремимся работать с нашими клиентами, чтобы обеспечить решение их проблем безопасности».
Пользователи с ранним доступом как из академических кругов, так и из промышленности высоко оценили Onyx в заявлении, сопровождавшем запуск продукта, хотя ни один из них не ответил на запросы о дальнейших комментариях.«Технология Inscripta позволяет геномным инженерам рационально модифицировать мишени в беспрецедентных масштабах», — говорится в заявлении Криса Войта, содиректора Центра синтетической биологии Массачусетского технологического института.
«Платформа Inscripta предоставила нам возможность беспрецедентно подробно изучить генетические зависимости действия антибиотиков», — сказал Джеймс Коллинз, также из Массачусетского технологического института.
«Платформа позволяет нам быстро и с минимальными затратами вносить большое количество генетических изменений в фабрики микробных клеток», — сказал Маркус Хергард, директор по науке о данных и автоматизации в Центре биоустойчивости Novo Nordisk Foundation при Техническом университете Дании. в заявлении.Это значительно ускорит наш прогресс в создании новых клеточных фабрик для устойчивого производства химических веществ». просматривать большие библиотеки точно отредактированных штаммов в невиданных ранее масштабах. Эти непревзойденные возможности будут использоваться для ускорения наших программ исследований и разработок в области микробиологии и сокращения времени выхода на рынок.
Inscripta отказалась сообщить, сколько других заказов она получила, но клиенты, которые получат Onyx, смогут получить доступ к «одной из наиболее интегрированных платформ инструментов для медико-биологических исследований, которые, возможно, когда-либо были созданы», — сказал Несс. Несс сказал, что Onyx позволяет использовать совершенно новый подход к редактированию генов.
«Это генератор и валидатор гипотез, — сказал он. делать. Вы можете просто сделать их все, а затем следовать данным.»
Gale Apps — Технические трудности
Технические трудности
Приложение, к которому вы пытаетесь получить доступ, в настоящее время недоступно. Приносим свои извинения за доставленные неудобства. Повторите попытку через несколько секунд.
Если проблемы с доступом сохраняются, обратитесь за помощью в наш отдел технической поддержки по телефону 1-800-877-4253. Еще раз спасибо, что выбрали Gale, обучающую компанию Cengage.
org.springframework.remoting.RemoteAccessException: невозможно получить доступ к удаленной службе [authorizationService@theBLISAuthorizationService]; вложенным исключением является Ice.UnknownException unknown = «java.lang.IndexOutOfBoundsException: индекс 0 выходит за границы для длины 0 в java.base/jdk.internal.util.Preconditions.outOfBounds(Preconditions.ява: 64) в java.base/jdk.internal.util.Preconditions.outOfBoundsCheckIndex(Preconditions.java:70) в java.base/jdk.internal.util.Preconditions.checkIndex(Preconditions.java:248) в java.base/java.util.Objects.checkIndex(Objects.java:372) в java.base/java.util.ArrayList.get(ArrayList.java:458) на com.gale.blis.data.subscription.dao.LazyUserSessionDataLoaderStoredProcedure.populateSessionProperties(LazyUserSessionDataLoaderStoredProcedure.ява: 60) в com.gale.blis.data.subscription.dao.LazyUserSessionDataLoaderStoredProcedure.reQuery(LazyUserSessionDataLoaderStoredProcedure.java:53) в com.gale.blis.data.model.session.UserGroupEntitlementsManager.reinitializeUserGroupEntitlements(UserGroupEntitlementsManager.java:30) в com.gale.blis.data.model.session.UserGroupSessionManager.getUserGroupEntitlements(UserGroupSessionManager.java:17) на com.gale.blis.api.authorize.contentmodulefetchers.CrossSearchProductContentModuleFetcher.getProductSubscriptionCriteria(CrossSearchProductContentModuleFetcher.java:244) на com.gale.blis.api.authorize.contentmodulefetchers.CrossSearchProductContentModuleFetcher.getSubscribedCrossSearchProductsForUser(CrossSearchProductContentModuleFetcher.java:71) на com.gale.blis.api.authorize.contentmodulefetchers.CrossSearchProductContentModuleFetcher.getAvailableContentModulesForProduct(CrossSearchProductContentModuleFetcher.java:52) в ком.gale.blis.api.authorize.strategy.productentry.strategy.AbstractProductEntryAuthorizer.getContentModules(AbstractProductEntryAuthorizer.java:130) на com.gale.blis.api.authorize.strategy.productentry.strategy.CrossSearchProductEntryAuthorizer.isAuthorized(CrossSearchProductEntryAuthorizer.java:82) на com.gale.blis.api.authorize.strategy.productentry.strategy.CrossSearchProductEntryAuthorizer.authorizeProductEntry(CrossSearchProductEntryAuthorizer.java:44) в ком.gale.blis.api.authorize.strategy.ProductEntryAuthorizer.authorize(ProductEntryAuthorizer.java:31) в com.gale.blis.api.BLISAuthorizationServiceImpl.authorize_aroundBody0(BLISAuthorizationServiceImpl.java:57) на com.gale.blis.api.BLISAuthorizationServiceImpl.authorize_aroundBody1$advice(BLISAuthorizationServiceImpl.java:61) на com.gale.blis.api.BLISAuthorizationServiceImpl.authorize(BLISAuthorizationServiceImpl.java:1) на com.gale.blis.auth._AuthorizationServiceDisp._iceD_authorize(_AuthorizationServiceDisp.java:141) в com.gale.blis.auth._AuthorizationServiceDisp._iceDispatch(_AuthorizationServiceDisp.java:359) в IceInternal.Incoming.invoke(Incoming.java:209) в Ice.ConnectionI.invokeAll(ConnectionI.java:2800) в Ice.ConnectionI.dispatch(ConnectionI.java:1385) в Ice.ConnectionI.message(ConnectionI.java:1296) в IceInternal.ThreadPool.запустить (ThreadPool.java: 396) в IceInternal.ThreadPool.access$500(ThreadPool.java:7) в IceInternal.ThreadPool$EventHandlerThread.run(ThreadPool.java:765) в java.base/java.lang.Thread.run(Thread.java:834) » org.springframework.remoting.ice.IceClientInterceptor.convertIceAccessException(IceClientInterceptor.java:365) org.springframework.remoting.ice.IceClientInterceptor.вызывать (IceClientInterceptor.java:327) org.springframework.remoting.ice.MonitoringIceProxyFactoryBean.invoke(MonitoringIceProxyFactoryBean.java:71) org.springframework.aop.framework.ReflectiveMethodInvocation.proceed(ReflectiveMethodInvocation.java:186) org.springframework.aop.framework.JdkDynamicAopProxy.invoke(JdkDynamicAopProxy.java:212) com.sun.proxy.$Proxy130.authorize(Неизвестный источник) ком.gale.auth.service.BlisService.getAuthorizationResponse(BlisService.java:61) com.gale.apps.service.impl.MetadataResolverService.resolveMetadata(MetadataResolverService.java:65) com.gale.apps.controllers.DiscoveryController.resolveDocument(DiscoveryController.java:57) com.gale.apps.controllers.DocumentController.redirectToDocument(DocumentController.java:22) jdk.internal.reflect.GeneratedMethodAccessor252.invoke (неизвестный источник) Ява.base/jdk.internal.reflect.DelegatingMethodAccessorImpl.invoke(DelegatingMethodAccessorImpl.java:43) java.base/java.lang.reflect.Method.invoke(Method.java:566) org.springframework.web.method.support.InvocableHandlerMethod.doInvoke(InvocableHandlerMethod.java:215) org.springframework.web.method.support.InvocableHandlerMethod.invokeForRequest(InvocableHandlerMethod.java:142) org.springframework.web.servlet.mvc.method.annotation.ServletInvocableHandlerMethod.invokeAndHandle(ServletInvocableHandlerMethod.java:102) org.springframework.web.servlet.mvc.method.annotation.RequestMappingHandlerAdapter.invokeHandlerMethod (RequestMappingHandlerAdapter.java:895) org.springframework.web.servlet.mvc.method.annotation.RequestMappingHandlerAdapter.handleInternal (RequestMappingHandlerAdapter.java:800) org.springframework.web.servlet.mvc.method.AbstractHandlerMethodAdapter.дескриптор (AbstractHandlerMethodAdapter.java:87) org.springframework.web.servlet.DispatcherServlet.doDispatch(DispatcherServlet.java:1038) org.springframework.web.servlet.DispatcherServlet.doService(DispatcherServlet.java:942) org.springframework.web.servlet.FrameworkServlet.processRequest(FrameworkServlet.java:998) org.springframework.web.servlet.FrameworkServlet.doGet(FrameworkServlet.java:890) javax.servlet.http.HttpServlet.service(HttpServlet.java:626) org.springframework.web.servlet.FrameworkServlet.service(FrameworkServlet.java:875) javax.servlet.http.HttpServlet.service(HttpServlet.java:733) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:227) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) орг.apache.tomcat.websocket.server.WsFilter.doFilter(WsFilter.java:53) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.apache.catalina.filters.HttpHeaderSecurityFilter.doFilter(HttpHeaderSecurityFilter.java:126) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.ява: 189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.web.servlet.resource.ResourceUrlEncodingFilter.doFilter(ResourceUrlEncodingFilter.java:63) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) орг.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:101) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:101) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.внутреннийDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:101) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.ява: 162) org.springframework.boot.web.servlet.support.ErrorPageFilter.doFilter(ErrorPageFilter.java:130) org.springframework.boot.web.servlet.support.ErrorPageFilter.access$000(ErrorPageFilter.java:66) org.springframework.boot.web.servlet.support.ErrorPageFilter$1.doFilterInternal(ErrorPageFilter.java:105) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:107) орг.springframework.boot.web.servlet.support.ErrorPageFilter.doFilter(ErrorPageFilter.java:123) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.boot.actuate.web.trace.servlet.HttpTraceFilter.doFilterInternal(HttpTraceFilter.java:90) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:107) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.web.filter.RequestContextFilter.doFilterInternal (RequestContextFilter.java: 99) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:107) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.web.filter.FormContentFilter.doFilterInternal (FormContentFilter.java:92) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:107) орг.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.web.filter.HiddenHttpMethodFilter.doFilterInternal (HiddenHttpMethodFilter.java:93) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:107) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.внутреннийDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.boot.actuate.metrics.web.servlet.WebMvcMetricsFilter.filterAndRecordMetrics(WebMvcMetricsFilter.java:154) org.springframework.boot.actuate.metrics.web.servlet.WebMvcMetricsFilter.filterAndRecordMetrics(WebMvcMetricsFilter.java:122) org.springframework.boot.actuate.metrics.web.servlet.WebMvcMetricsFilter.doFilterInternal(WebMvcMetricsFilter.java:107) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:107) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.web.filter.CharacterEncodingFilter.doFilterInternal (CharacterEncodingFilter.java:200) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:107) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.apache.catalina.core.StandardWrapperValve.invoke(StandardWrapperValve.ява: 202) org.apache.catalina.core.StandardContextValve.invoke(StandardContextValve.java:97) org.apache.catalina.authenticator.AuthenticatorBase.invoke(AuthenticatorBase.java:542) org.apache.catalina.core.StandardHostValve.invoke(StandardHostValve.java:143) org.apache.catalina.valves.ErrorReportValve.invoke(ErrorReportValve.java:92) org.apache.catalina.valves.AbstractAccessLogValve.invoke(AbstractAccessLogValve.ява: 687) org.apache.catalina.core.StandardEngineValve.invoke(StandardEngineValve.java:78) org.apache.catalina.connector.CoyoteAdapter.service(CoyoteAdapter.java:357) org.apache.coyote.http11.Http11Processor.service(Http11Processor.java:374) org.apache.coyote.AbstractProcessorLight.process(AbstractProcessorLight.java:65) org.apache.coyote.AbstractProtocol$ConnectionHandler.process(AbstractProtocol.ява: 893) org.apache.tomcat.util.net.NioEndpoint$SocketProcessor.doRun(NioEndpoint.java:1707) org.apache.tomcat.util.net.SocketProcessorBase.run(SocketProcessorBase.java:49) java.base/java.util.concurrent.ThreadPoolExecutor.runWorker(ThreadPoolExecutor.java:1128) java.base/java.util.concurrent.ThreadPoolExecutor$Worker.run(ThreadPoolExecutor.java:628) org.apache.tomcat.util.threads.TaskThread$WrappingRunnable.запустить (TaskThread.java: 61) java.base/java.lang.Thread.run(Thread.java:834)
.